TCB1-3细胞与细胞培养.pdf

第四节 细胞培养 Cell culture 本课件仅供教学使用，请务擅自复制、公开传播。 细胞的培养（cell culture ） • 与组织培养（tissue culture ）是同义词，泛指所 有的体外培养，即器官、组织和细胞培养的总称。 其本意是从活体内取出的组织或细胞，模拟体内 生理环境，在体外建立无菌、适温和一定营养的 条件，使细胞生存和生长，并维持其结构与功能 的方法。 • 细胞培养技术可以从细胞水平上帮助人类揭开生、 老、病、死的规律，探索优生、优育、抗衰老和 防治疾病的手段与途径，人为地诱导细胞遗传性 状的改变，使其向更有利于人类和自然界的方向 发展。 本课件仅供教学使用，请务擅自复制、公开传播。 •培养细胞的优点是可在体外条件下依其需要设计实 验方案，不受体内复杂环境的影响而研究细胞的生 命活动及规律。 •细胞离体置瓶皿中培养，由于所处环境与条件的局 限性，因此在研究中应避免将体外培养细胞的实验 结果机械地看作体内同种细胞性状的反映。反之， 离体的细胞系统均会受到人为设计的体外营养系统 及环境系统的影响，设计的环境越接近体内状况一 步，培养细胞的性状就向回归体内跨越一步，这都 是细胞培养技术所涉及的具体问题。 本课件仅供教学使用，请务擅自复制、公开传播。 第五节 细胞培养研究内容和术语 本课件仅供教学使用，请务擅自复制、公开传播。 细胞培养研究内容 •培养细胞学与细胞培养技术可从细胞水平上帮助 人类揭开生、老、病、死的规律，探索优生、抗 衰老、防治疾病的手段或途径，人为地诱导细胞 遗传性状的改变，使其向更有利于人类和自然界 的方向发展。尤其随着细胞生物学和分子生物学 的相互渗透，分子克隆技术与细胞培养技术相结 合，在阐明基因的结构与功能、基因在细胞生长 和分化中的作用、细胞癌变机制等方面起了重要 作用。 本课件仅供教学使用，请务擅自复制、公开传播。 1. 培养细胞学在病毒学中的应用培 养细胞为病毒的增殖提供了场所 • 细胞是分离病毒最好和最方便的基质，体外培养细胞 无抗体及非特异拮抗物质的影响，而且对病毒的敏感 性较体内细胞为高，采用离心感染法或提取病毒核酸 进行感染，并以细胞打孔器协助感染可扩大病毒感染 的宿主范围；病毒感染指标容易观察，光学显微镜下 就可见到细胞病变效应（cytopathic effect，CPE ）、 包涵体、细胞融合、血细胞吸附等现象，同时也便于 用分子病毒学技术进行检测。利用细胞培养可准确进 行病毒定性和定量的研究，测定50 ％组织培养感染量 （50 ％tissue culture infectious dose ，TCID50 ），并 用于病毒感染及防治方面的研究。 本课件仅供教学使用，请务擅自复制、公开传播。 正常细胞 细胞病变效应CPE 某些病毒感染的细胞内，光镜下可见在胞浆或核内出现嗜酸 性或嗜碱性染色，大小、数量不等，圆形或不规则形的团块 结构。 本课件仅供教学使用，请务擅自复制、公开传播。 2 ．细胞生物学的基础研究 •单个细胞克隆便于对细胞生物学的基础理论进行 研究，如细胞形态、结构、细胞器及其功能、遗 传物质、核型、变异、细胞转化、生长周期等。 离体培养细胞便于进行环境因素、药物等单因素 及多因素影响的研究，探索其作用机制。当今细 胞生物学研究的热点，如细胞通讯和细胞信号转 导、细胞增殖与细胞周期的调控、细胞生长和分 化、细胞的衰老和死亡