2015年高考生物重点强化 高考常考的5个微专题之（一）破解酶实验难题的三种方法课件.ppt

过氧化氢的分解受温度的影响，不宜用来探究温度对酶活性的影响； 碘液遇淀粉变蓝色，淀粉酶把淀粉分解为麦芽糖，麦芽糖和蔗糖遇碘液都不变色，故不能验证酶的专一性； 新鲜的猪肝研磨液中含有过氧化氢酶，能分解过氧化氢，氯化铁属于无机催化剂，可利用过氧化氢、新鲜的猪肝研磨液和氯化铁溶液研究酶的高效性； 胃蛋白酶的最适pH为2左右，用pH分别为3、7、11的缓冲液验证pH对酶活性的影响不合理。 从图中可以看出，Mn2＋只是提高了某水解酶活性，但并不能降低反应过程所必需的活化能； Co2＋或Mg2＋可能导致酶结构的改变使某水解酶活性降低； 从图中可以看出，有的离子可以提高酶的活性，有的离子可以降低酶的活性； 不同金属离子是实验的自变量，该水解酶的活性是实验的因变量，该水解酶的用量是实验的无关变量。 65 30% 200 5% 65 20% 100 4% 50 10% 50 2% 25 5% 25 1% 0 0 0 0 相对反应速率 乳糖浓度 相对反应速率 酶浓度 实验二(酶浓度为2%) 实验一(乳糖浓度为10%) 在底物足够多的情况下，酶促反应速率会随酶浓度增加而加快，实验一若继续增加酶浓度相对反应速率可能会增大； 当所有的酶都参与反应时，反应速率将达到最大，实验二若继续增加乳糖浓度，相对反应速率不会增大； 本实验结果是在其他条件均为最适情况下获得的，故实验二再提高温度，相对反应速率会下降。 * 已知蛋白液＋双缩脲试剂→紫色反应 ④ 已知RNA溶液＋吡罗红染液→出现红色 ③ 待测酶液＋双缩脲试剂→是否出现紫色 ② 待测酶液＋吡罗红染液→是否呈现红色 ① 实验处理 组别 酶具有高效性 结论 反应速率缓慢；或反应用时长 反应速率很快；或反应用时短 现象 等量的无机催化剂 与底物相对应的酶溶液 试剂 等量的同一种底物 材料 对照组 实验组 项目 酶具有专一性 酶具有专一性 结论 不发生反应 发生反应 不发生反应 发生反应 现象 同一种酶(等量) 另外一种酶 与底物相 对应的酶 试剂 另外一 种底物 与酶相对 应的底物 底物相同(等量) 材料 对照组 实验组 对照组 实验组 方案二 方案一 项目 － ＋ － ＋ 甲 唾液淀粉酶溶液 蔗糖酶溶液 淀粉溶液 蔗糖溶液 溶液 试管 － ＋ ＋ － 丁 ＋ － － ＋ 丙 ＋ － ＋ － 乙 － ＋ － ＋ 甲 唾液淀粉酶溶液 蔗糖酶溶液 淀粉溶液 蔗糖溶液 溶液 试管 生成物量最多的一组，或底物剩余最少的一组所处温度(或pH)为最适温度(或pH) 实验结论 相同时间内，各组酶促反应中生成物量的多少，或底物剩余的多少 衡量指标 Tn … T2 T1 温度 an … a2 a1 pH 等量的同种底物 实验材料 n … 2 1 组别编号 本实验的因变量是气泡的产生速率，即过氧化氢的分解速率。 本实验中温度是自变量，酶的用量是无关变量。 1号与3号、1号与4号中都只有一个实验变量不同，可分别构成对照实验。 2号在高温下反应加快，是因为加热使过氧化氢分子得到能量，从常态转变为容易发生化学反应的活跃状态。 ①图中乙酶经蛋白酶处理，分子结构改变，活性下降； ①图中甲酶经蛋白酶处理后活性不变，说明甲酶本质不是蛋白质，可能是RNA； 据题干信息，②图的酶活性不随外界温度变化而变化的原因是其可能是恒温动物体内的酶。 由图可知，曲线Ⅱ的酶促反应速率较曲线Ⅰ低，而二者的区别是Ⅱ加入了化合物X，则可以推测化合物X降低了淀粉酶的活性，或化合物X升高了淀粉水解反应的活化能； 从实验处理上看，曲线Ⅰ是对照实验； 从题图可知曲线Ⅰ、Ⅱ对应的最适温度是相同的。 碘液 淀粉酶 蔗糖 淀粉 D 斐林试剂 淀粉酶 蔗糖 淀粉 C 斐林试剂 蔗糖酶 麦芽糖 蔗糖 B 斐林试剂 麦芽糖酶 葡萄糖 麦芽糖 A b组 a组 分别加入等量的试剂 分别加入等量的酶 等量的底物 选项 麦芽糖和葡萄糖都是还原糖，因此使用斐林试剂鉴定，a、b两组都会有砖红色沉淀生成。 蔗糖虽然没有还原性，但是被蔗糖酶水解后会有还原糖生成。 淀粉可被淀粉酶催化水解，因此，反应完成后，a、b两组都没有淀粉存在，用碘液检测也不合理。 淀粉和蔗糖都不具有还原性，在淀粉酶的催化下，淀粉水解生成麦芽糖和葡萄糖，而蔗糖不能被淀粉酶催化水解，因此可用斐林试剂进行检测。 温度为37 ℃比25 ℃时更适于胃蛋白酶催化作用的发挥。 再加入1 mL体积分数为5%的胃液稀释液虽然能够提高反应速率，但不能提高酶的活性。 胃蛋白酶的最适pH为1.5～2.2，将pH由2调为7时，酶可能变性失活。 加入1 mL唾液，因唾液中无蛋白酶，故唾液作为溶剂，反而会使溶液的pH变大，使酶活性下降。 *