以穿膜肽为载体的分子治疗和分子影像研究进展.pdfVIP

同时，发挥多层CT的强项，高清晰地显示示踪剂浓聚部位的精细结构特征和周围解剖关系。 PET／CT利用同机的多层CT功能，有助于观察病变细节和小病灶，克服部分容积效应伪像， 便于临床医生的理解与应用。这种融合影像，放大了各自的技术潜力，提高病变的检测能力 和准确性，减少检查和分析所需时间，提高治疗的科学性、安全性和有效性，产生了1+1 2的效果。所以有人说：PET／CT是“连接影像医生和临床医生的桥梁”。相信核医学将以此 为契机，扩大与超声、放射、放疗、MRI等技术的互相借鉴、互相渗透，更好服务于国人健 康事、I匕。 以穿膜肽为载体的分子治疗及分子影像研究进展 郭佑民刘敏西安交通大学医学院第二附属医院影像中心(710004) 随着对生命现象及疾病本质的深入研究，人类已经认识到绝大多数疾病只有在分子水平 诊断治疗，才能达到真正意义上的“治愈”，但是其中面f临的一个主要问题是许多有“诱人的 前景”的生物活性大分子由于细胞膜天然屏蔽的限制作用无法进入细胞内发挥它们作用，此 外像DNA等大分子通过胞吞作用进入细胞u1，在内涵体内运输，最终在溶酶体内被溶酶体酶 降解。目前使用的显微注射法或电穿孔法这样的方法用于传递无生物膜穿透性的分子，在本 质上是有细胞创伤性的，可能损伤甚至破坏细胞膜心’31而非侵袭性的方法包括使用对pH敏感 的脂质体H’，则要求低酸环境下在内涵体的膜失去稳定性从而释放内嵌的药物进入胞质，对 于人体生理环境中药物作用的研究具有一定局限性。 传递这些分子的最新方法是把它们结合细胞膜穿透肽上，携带分子传递到细胞内。本文 就以穿膜肽为载体的分子治疗和分子影像研究进展作一综述，以提高对穿膜肽在分子水平成 像及治疗价值的深入认识。 一、胞穿膜肽发展史 细胞穿膜肽(cell—penetratingpeptides translocationdomain Frankel两个独立课题组等嫡’61同时报道了人的免疫缺陷病毒(HIV)中有一种转录调节蛋白 TAT，它能进人细胞核激活HIV一1的启动子从而促进HIV的扩增。最初研究人员的焦点集中 在TAT对HIV的启动作用，但是随后的研究发现TAT蛋白本身具有一种极其特殊的生物学 活性：它可以直接穿过细胞膜、细胞核膜并锚着于特异的基因调控区内。之后的大量研究又 发现了来源、氨基酸组成、转运速度各不相同但都具穿膜转运功能的短肽，学者 derivedCPPs)、 Eiriksdottir。¨根据这些短肽的特点，来源将其分为蛋白衍生肽(protein 模型肽(model cpps)三大类，尽管穿膜肽氨基酸组成、 peptides)以及设计肽(designed 结构各不相同，转导机制还不是非常清楚，但是多年研究哺。2副已经证实：①cPPs均具有净正电 荷性；‘②穿膜转运效率高(R9穿膜素Tat)其介导的转导过程不依赖于受体和转运蛋白，也 不需要能量，转运不受温度影响，在4℃下仍然可以进行转导和穿膜；③可以导入近乎所有 的细胞，包括破骨细胞、外周血单核细胞及原代细胞等常规方法难以转染的细胞，甚至还可以 穿过血脑屏障心扣劓1；④不但可以单独跨膜进入细胞，而且可以携带多种活性物质进人细胞； ⑤可以通过固相合成或原核表达制备，方法成熟简便。正是由于穿膜肽具备了以上的优势，自 穿膜肽发现以来人们利用穿膜肽技术已将蛋白质、抗体、核酸、显像剂、脂质体等多类物质 导入细胞一叫制，为疾病研究、诊断及治疗提供了新的手段。目前利用基因重组技术制备穿膜 肽HIV—Tat和其他蛋白质的重组蛋白用于疾病治疗也是我国研究的热点比玑29棚’3扣矧，并以取 得了可喜的成果。 二、穿膜肽的应用 大量研究表明穿膜肽具有强大的运载潜能，不仅可以携带多肽、GFP、RNA酶、半乳糖苷 酶等蛋白质，而且可以携带DNA、反义核酸、荧光素、有机分子、脂质体及铁颗粒等无机物。 运载能力可以达到120 kD(如半乳糖苷酶)、40nm(如铁颗粒)，没有明显的证据表明运载 极限‘叫训。 1．转运蛋白：穿膜肽可以结合多种蛋白将其带人靶细胞。体外研究显示TAT肽。削可以携 带B一半乳糖苷酶，辣根过氧化物酶，RNA酶A，和假单胞菌外毒素A(PE)的Ⅲ区，进入不 同类型的细胞。体内研究TAT—p一半乳糖苷酶可以传递到不同的组织内，在心、肝、脾内活 性高，在肺