白色念珠菌生物膜体内外模型的构建.pdfVIP

耐药或泛耐药菌的产生，使得革兰阴性杆菌感染的治疗面临诸多挑战。MDR或XDR—PA、MDR 或XDR—AB及耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌感染，国内外指南均推荐大剂量联合抗菌治疗，替 加环素、米诺环素、多粘菌素、氨基糖苷类、碳青霉烯类、13一内酰胺类／B一内酰胺酶抑制 剂复合制剂等可供选择组合。目前针对耐药革兰阴性杆菌感染治疗方案的大样本随机对照 研究不多，建议根据病原菌药敏结果、本地区或医院细菌耐药现状、患者基础疾病及营养 免疫状况制定个体化联合治疗方案。 白色念珠菌生物膜体内外模型的构建 谷文睿1，孙淑娟2 山东大学药学院；2山东大学附属千佛山医院 摘要：白色念珠菌生物膜是白色念珠菌附着于活体组织或非活体组织表面，由自身产生的 胞外多聚基质包裹而成的菌细胞群体。作为院内感染的主要致病真菌，白色念珠菌的慢性 难治性特点与其形成的生物膜密切相关。生物膜的诸多生物学特征与其游离菌形态有明显 不同。合适的生物膜模型的构建对于研究白色念珠菌生物膜的形态结构、形成机制及药物 干预效果至关重要。因此生物膜模型构建问题一直是真菌抗感染相关领域的研究热点。本 文总结了近年来用于白色念珠菌生物膜研究的体内外模型，对其构建方法、应用范围、优 点及局限性作一综述。 关键词：抗真菌感染；白色念珠菌：生物膜；体外模型；体内模型 引言 念珠菌群是目前院内感染的主要致病微生物之一，主要以白色念珠菌(Canida albicans)为代表[1]。近年来真菌感染逐渐呈上升趋势的原因有两点：一是广谱抗生素、 免疫抑制剂的广泛使用，干扰了体内正常菌群的生态平衡，导致念珠菌群过度生长；另一 方面是侵入性操作以及体内治疗装置，如静脉插管、导尿管等使用较多。美国国家医院感 染检测系统在2002年的调查表明，以白色念珠菌为主的真菌感染在导管相关感染中居第三 位，在条件致病菌感染中居第二位，并且有着极高死亡率[2]。 在体内和人工器械表面，白色念珠菌以生物膜(biofilm)的形式存在。生物膜这一形 式可使白色念珠菌有效抵御机体免疫力和抗真菌药物，在合适的条件下引起相关疾病[3]。 白色念珠菌生物膜是白色念珠菌附着于活体或非活体组织的表面，由自身产生的胞外多聚 基质(wxtracellularmatrix，ECM)包裹的有一定结构和功能的菌细胞群体[4]。白色念珠 菌生物膜结构表现为基底数层酵母细胞黏附在物体表面，上方由E叫覆盖，内部有大量菌 丝生长。白色念珠菌处于生物膜状态下，其形态结构、生理生化特点、致病性、对药物的 敏感性等均与浮游状态时有显著差异[5]。一般的抗生素都是针对浮游形式的微生物设计， 因此念珠菌属常表现出高度耐药，造成难治性感染。生物膜已成为近年来抗感染领域的研 究热点，操作简单、重现性好的生物膜模型对于研究生物膜形成机制和评估药物干预效果 具有重要意义。目前在白色念珠菌生物膜方面的研究取得了较大进展。白念菌生物膜的形 成机制、耐药机制以及相关基因和调控因素都有不同程度的发现。生物膜在人体内的真实 208 情况也通过体内模型进行了模拟。这些进展都归功于白色念珠菌生物膜体内模型的不断完 善和改进。 该综述总结了试验中广泛应用的生物膜模型，对其构建过程、应用方法和改进方向进 行了分析并探讨其优越之处和局限性。同时，本综述还展望了生物膜体内外模型的进一步 发展方向。 一．白念菌生物膜体外模型 根据培养基质的不同，常用的体外模型可以分为五类：微孔板模型、导管片模型、滤 膜模型、软性镜片模型和培养皿模型。微孔板模型由于其快捷、有效、可靠且重复性高的 优点在抗真菌敏感性试验中最为广泛应用。导管片模型使用医用导管圆片作为培养基以研 究生物材料相关的感染。滤膜模型用于研究生物膜的透过性，是研究生物膜耐药性机制的 有力工具。CDC生物膜反应器和平行板流动小室模型可模拟体内血液流动情况，用于研究 真菌生物膜和宿主组织的相互反应。 biofilm 1．1微孔板模型及Calgarydevice(CBD) RamageGordon[6]在2001年以96孔板为载体，建立了白色念珠菌生物膜体外模型构 建的标准方法。该法将白色念珠菌接种于YPG培养基中，35。C摇床过夜培养，收集菌体， u 用RPMll640培养基稀释，调整菌