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代谢控制发酵(Metabolic Control fermentation):用人工诱变的方法,有意识地改变微生物的代谢途径,最大限度地积累产物,这种发酵形象地称为代谢控制发酵,最早在氨基酸发酵中得到成功应用。 临界氧浓度(critical value of dissolved oxygen concentration) :指不影响菌的呼吸所允许的最低氧浓度。如对产物形成而言便称为产物合成的临界氧浓度。 下游技术(工程) (downstream processing):对于由生物界自然产生的或由微生物菌体发酵的、动植物细胞组织培养的、酶反应等各种生物工业生产过程获得的生物原料,经提取分离、加工并精制目的成分,最终使其成为产品的技术。 盐析(Salt induced precipitation):在高浓度的中性盐存在下,蛋白质(酶)等生物大分子物质在水溶液中的溶解度降低,产生沉淀的过程。 色谱分离(Chromatographic Resolution,CR)利用多组分混合物中各组分物理化学性质(如吸附力、分子极性、分子形状和大小、分子亲合力、分配系数等)的差别,使各组分以不同程度分布在固定相和流动相中。当多组分混合物随流动相流动时,由于各组分物理化学性质的差别,而以不同的速率移动,使之分离。 菌种的保藏方法:A斜面冰箱保藏法B沙土管保藏法 C石蜡油封存法 D真空冷冻干燥保藏法 E液氮超低温保藏法 微生物初级代谢调节:酶活调节、酶合成调节、遗传控制 修饰初级代谢中间体的三种生化过程:生物氧化与还原、生物甲基化、生物卤化 种子扩大培养造成染菌主要原因 :设备渗漏、空气带菌、种子带菌 、灭菌不彻底、技术管理不善 整个下游加工过程应遵循四个原则:1) 时间短;2) 温度低3) pH适中4) 严格清洗消毒 固液分离的方法:重力沉降、浮选、悬液分离、介质过滤、离心。 常用破碎方法:【机械法】珠磨法、高压匀浆法、超声破碎法、X-press法【非机械法】酶溶法、化学渗透法、渗透压法、冻结融化法、干燥法 膜过滤法过程:微滤、超滤、纳滤和反渗透 离子交换树脂的理化性能指标:1)外观2)交联度3)化学稳定性4)机械强度5)交换量 白酒的四大香型:清香、酱香、浓香、米香 酶制剂的生产方法:固态发酵法、深层液体培养法 【菌种的衰退表观现象有哪些?】目的产物的产量下降;营养物质代谢和生长繁殖能力下降;发酵周期延长;抗不良环境的性能减弱。 【菌种的衰退原因】:菌种保藏不当;提供了不当的条件或不利的条件;经诱变得到的新菌株发生回复突变。 【菌种保藏方法】:斜面冰箱保藏法、沙土管保藏法、石蜡油封存法、真空冷冻干燥保藏法、液氮超低温保藏法 【连续发酵】:指培养基料液连续输入发酵罐,并同时放出含有产品的发酵液的培养方法。在这样的环境中培养,菌的生长就受到所提供基质的限制,培养液中的菌体浓度能保持一定的稳定状态。 与传统的分批发酵相比,连续培养有以下优点: ① 维持低基质浓度:可以除去快速利用碳源的阻遏效应,并维持适当的菌体浓度,使不至于加剧供氧的矛盾;② 避免培养基积累有毒代谢物;③ 可以提高设备利用率和单位时间的产量,节省发酵罐的非生产时间;④ 便于自动控制。 【连线】concentration factor浓缩率 separation factor分离因子 extraction萃取 reverse osmosis 反渗透 membrane separation膜分离 ion-exchange离子交换 cross-flow filtration错流萃取 membrane separation离心 ultra-filtration 超滤 【改变细胞膜通透性的方法】 1、限制培养基中生物素浓度在1~5mg/L,控制细胞膜中脂质的合成; 2、加入青霉素,抑制细胞壁肽聚糖合成中肽链的交联; 3、 加入表面活性剂如吐温80或阳离子表面活性剂(如聚氧化乙酰硬脂酰胺),将脂类从细胞壁中溶解出来,使细胞壁疏松,通透性增加; 4、控制Mn2+、Zn2+的浓度,干扰细胞膜或细胞壁的形成; 5、可以通过诱变育种方法,筛选细胞透性突变株。 【离子交换树脂的工作过程】: 1)树脂预处理:新树脂装入柱后,先用去离子水浸泡12h左右,使树脂充分吸水膨胀,再用2-3倍树脂体积10%左右食盐水浸泡4h以上。用水洗净残留的NaCl,再根据树脂类型和使用所需要的型号分别用酸和碱处理,最后调pH值至所需范围。 2)上柱交换交换方式:采用顺流和逆流进行 3)洗脱:用亲和力更强的同性离子取代树脂上吸附的目的产物。 4)树脂的再生:先用清水洗涤,然后用再生剂再生,最后用清水洗至所需pH值。 【枯草杆菌BF-7658液体深层发酵生产α-淀粉酶的发酵控制】: 种子制备: 孢子培养一般采用马铃薯培养

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