鸡胚胎干细胞能量代谢的特点.pdfVIP

中国科学: 生命科学 2010 年 第40 卷 第10 期: 938 ~ 951 SCIENTIA SINICA Vitae SCIENCE CHINA PRESS 论 文 鸡胚胎干细胞能量代谢的特点 * 李佳, 张宝路, 韩红兵, 曹之辰, 连正兴 , 李宁 中国农业大学动物科技学院, 农业生物技术国家重点实验室, 北京 100193 * 联系人, E-mail: Lianzhx@ 收稿日期: 2010-03-02; 接受日期: 2010-04-19 国家重点基础研究发展计划(批准号: 2006CB102100)和国家自然科学基金(批准号:资助项目 摘要 细胞能量代谢与细胞生命活动紧密相关, 但目前对于鸡胚胎干细胞能量代谢特点 关键词 的研究较少. 本研究利用前期建立的 chES 细胞模型, 通过电子显微镜发现未分化的 chES chES 细胞 能量代谢 细胞胞质内储存大量糖原颗粒和卵黄颗粒. 逆转录-聚合酶链反应对能量代谢途径中的主要 糖原 限速酶的基因表达分析显示, 未分化的chES 细胞不表达丙酮酸羧化酶和磷酸烯醇式丙酮酸 细胞命运 羧激酶, 与鸡胚胎成纤维细胞相比低表达葡萄糖转运蛋白 1 和磷酸果糖激酶, 高表达己糖 6-磷酸葡萄糖 激酶1 和糖原合成酶; 分化中的chES 细胞与成年母鸡肝脏相比少量表达PCX 和PCK2, 与 CEF 细胞相比高表达GLUT1, HK1, PFK, 而GYS 的表达没有显著性差异. 过碘酸希夫氏染 色显示, 细胞培养过程中未分化 chES 细胞中储存的糖原颗粒未见减少, 而分化中的 chES 细胞的糖原颗粒逐渐减少. 此外, 通过赫斯特荧光染料33342 和碘化丙啶双染色发现, 大量 未分化的 chES 细胞在体外培养过程中死亡, 而添加外源性 6-磷酸葡萄糖显著减少细胞死 亡. 上述结果说明, 未分化 chES 细胞主要以糖原合成为主, 无糖异生代谢, 而分化中的 chES 细胞以糖酵解代谢为主. 未分化的chES 细胞以大量消耗代谢中间产物G6P 为代价进 行糖原合成, 造成细胞内源性 G6P 相对不足引起细胞死亡. 因此, 细胞内糖原的含量反映 了chES 细胞的分化程度. chES 细胞在体外培养时可通过添加G6P 来提高生存率. [7,8] 鸡胚胎干细胞(chicken embryonic stem cells, 颗粒 ; 由其分离的chES 细胞胞质中同样含有许多 [9,10] chES)是一类从鸡 X 期胚盘分离, 体外培养时可以无 卵黄颗粒 . 这些贮藏能量物质大量出现在前体细