BYZX在动物体内的代谢及药物动力学的研究.docVIP

BYZX在动物体内的代谢及药物动力学研究 陈誊 1前言 阿尔兹海默病 (简称AD)又称老年痴呆症，是一种不可逆的、渐进性的脑功能障碍，临床表现为记忆障碍、智力减退并伴有其他认知功能损害[],是这个时代威胁人类健康的最严重的疾病之一。综观多年来AD治疗研究的进展，尽管发现了抗凋亡[]、抗炎、抗淀粉样蛋白、钙通道拮抗剂[]、神经营养因子、NMDA受体拮抗剂[]等多种治疗AD的新途径、新方法，但胆碱酯酶抑制剂仍是目前公认治疗AD有效且应用与研究较多的药物。 BYZX[(E)-2-(4-((diethylamino)methyl)benzylidene)-5，6-dimethoxy-2，3-dihydroinden-one]为茚酮类化合物，它是在第二代AD治疗药物多奈哌齐的基础上通过结构修饰合成的新化合物，是用于治疗阿尔茨海默病的胆碱酯酶(AchE)抑制剂，能够增加大脑乙酰胆碱含量，可有效的治疗早、中期老年性痴呆。[]该药物由浙江大学药物化学实验室合成，已有研究发现其对东莨菪碱诱发空间学习记忆障碍有改善作用[]，其体外吸收、代谢、药物相互作用研究也已完成，发现其不是P-糖蛋白的底物或抑制剂，不会被P-糖蛋白外排至细胞外而影响其吸收。在代谢方面，通过人肝微粒体体外孵育实验，确定了其在人肝微粒体中主要通过CYP3A4介导发生一相代谢反应，代谢产物为N一脱乙基BYZX。药物-药物相互作用实验结果显示，地平类药物对其代谢有较强的抑制作用，而BYZX 对各种CYP450的经典底物都没有明显的抑制作用，通过体外代谢和相互作用研究表明其在细胞色素P450酶介导的药物代谢水平上是相对安全的。[] 本实验旨在考察BYZX在大鼠、小鼠体内的吸收、分布、代谢、排泄，建立其药时曲线、考察其在鼠体脏器内的分布，在血浆、胆汁、尿液、粪便中的代谢产物，考察其不同时间在尿液、粪便中的排泄率，完成BYZX在大鼠、小鼠体内的药物动力学研究，为其进一步的临床应用提供参考。 3. 实验技术路线和实验方案 3.1 通过系列预实验确定大鼠和小鼠的给药方案，建立生物样品（血清、胆汁、尿、粪、脑、心、肝、脾、肺、肾、胃壁、十二指肠壁、小肠壁）中检测BYZX及其代谢产物的LC-MS方法。确立生物样品的提取方法，选择色谱条件，优化质谱条件，并进行方法学验证，考察检测限、定量限、稳定性、专属性、精密度、准确度、线性和范围、耐用性等。 3.2 BYZX在大鼠体内的代谢动力学研究 3.2．1 BYZX在大鼠体内的吸收动力学 对大鼠进行灌胃后,于不同时间点眼眶取血，离心取血清，测定大鼠单次口服不同时刻血清中BYZX的浓度，绘制了血药浓度-时间曲线。根据血药浓度-时间数据，采用梯形法计算AUC值，以半对数作图法，由消除相末端的浓度点计算消除常数和t1/2，并求出主要药物动力学参数Tmax、Cmax和口服给药后的绝对生物利用度F。 3.2.2 BYZX及其代谢产物在大鼠体内的分布 对大鼠进行灌胃后，于不同时间点测BYZX在血清、胆汁、尿、粪、脑、心、肝、脾、肺、肾、胃壁、十二指肠壁、小肠壁的浓度，以及其代谢产物在各组织中的相对丰度。 3.2.3 BYZX在大鼠体内的代谢 对大鼠进行灌胃后，于不同时间点取血、胆汁、尿、粪，测其代谢产物，特别留意是否有未曾报道的一相、二相代谢物出现、出现时间等。 3.2.4 BYZX在大鼠体内的排泄动力学 对大鼠进行灌胃后，于不同时间点收集胆汁、尿、粪，测BYZX及其代谢产物的排泄量、累积排泄量、占剂量百分比。 3.3 BYZX在小鼠体内的代谢动力学研究 3.3.1 BYZX在小鼠体内的吸收动力学 对小鼠进行灌胃后,于不同时间点眼眶取血，测定小鼠单次口服后不同时刻血清中BYZX的浓度，绘制了血药浓度-时间曲线。根据血药浓度-时间数据，采用梯形法计算AUC值，以半对数作图法，由消除相末端的浓度点计算消除常数和t1/2，并求出主要药物动力学参数Tmax、Cmax和口服给药后的绝对生物利用度F。 3.3.2 BYZX及其代谢产物在小鼠体内的分布 对小鼠进行灌胃后，于不同时间点测BYZX在血清、胆汁、尿、粪、脑、心、肝、脾、肺、肾、胃壁、十二指肠壁、小肠壁的浓度，以及其代谢产物在各组织中的相对丰度。 3.3.3 BYZX在小鼠体内的代谢 对小鼠进行灌胃后，于不同时间点取血、胆汁、尿、粪，测其代谢产物，特别留意是否有未曾报道的一相、二相代谢物出现、出现时间等。 3.3.4 BYZX在小鼠体内的排泄动力学 对小鼠进行灌胃后，于不同时间点收集胆汁、尿、粪，测BYZX及其代谢产物的排泄量、累积排泄量、占剂量百分比。 4可行性分析： 4.1研究思路的可行性 本研究方案有充分的理论依据。本方案通过对大鼠和小鼠的体内代谢及动力学研究，为下一步的临床应用提供参考。 4.