提高白菜离体培养植株再生频率的研究.pdfVIP

园　艺 　学 　报 　2000 , 27 (6) : 452～454 Acta Horticulturae Sinica 提高白菜离体培养植株再生频率的研究 曹家树 　余小林 　黄爱军 　徐淑英 (浙江大学蔬菜研究所 , 杭州 310029) 摘 　要 : 选用 7 个白菜类蔬菜栽培品种和 1 个杂交亲本进行离体培养植株再生试验 , 筛 选出最佳培养基配方为 1/ 2 倍 NH + 浓度的 MS 培养基附加 BAP 2 mg/ L 、NAA 0 . 45 mg/ L 和 4 AgNO3 7 . 5 mg/ L , 大幅度提高了植株的再生频率 , 高达 84 . 8 % , 大大缩短成苗周期 ; 子叶 —子 叶柄接种后 , 最早的仅需6 d 即可分化出不定芽 , 从接种到再生苗的移栽最快的仅需40 d , 平 均一批约需 50 d , 达到了高频快速的要求 ; 该培养基对 白菜类蔬菜的不同品种有着较广的适 应性 。对不定芽的发生过程进行组织学观察表明 , 在本试验条件下 , 白菜离体培养植株再生 方式为外植体直接出芽 。再生苗生根后移栽的成活率可达 95 %以上 。 关键词 : 白菜 ; 离体培养 ; 组织培养 ; 器官发生 中图分类号 : Q 813 ; S 634 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2000) 1 　目的、材料与方法 本试验旨在筛选出对白菜类蔬菜具有较广适应性的培养基配方 , 以大幅度提高植株再生频率 , 为深 入开展遗传转化研究奠定基础 。供试白菜品种为杭州油冬儿 、上海青 、矮抗青 、矮脚黄 、矮脚黄 AB 系 、 圆叶薹菜 、油青菜心和香港菜心等 8 个 , 均由本实验室提供 。 培养基为 1/ 2 倍 NH + 浓度的MS 培养基的盐类及维生素 、2 %蔗糖 、0 . 8 %琼脂 , 不同浓度的BAP 和 4 ( NAA 组合 BAP 2 mg/ L 分别与NAA 的0 、0 . 15 、0 . 3 、0 . 45 、0 . 6 mg/ L 配合 ; NAA 0 . 45 mg/ L 与 BAP 的 0 、 ) ( ) 1 、3 、4 、5 mg/ L 配合 , p H 值调至 5. 8 。在 25 ±1 ℃和 16 h 光照/ 8 h 黑暗的条件下培养 , 光强为 2 000 ( ) ～2 500 lx 。取 4～5 d 的无菌苗用手术刀片齐生长点切下带子叶柄的子叶 简称子叶 - 子叶柄 、只留一 ( ) ( ) 半长度子叶柄的子叶 简称子叶 - 半子叶柄 、只有子叶块无子叶柄 简称子叶块 、只有子叶柄无子叶 ( ) ( ) 块 简称子叶柄 及其真叶切块 简称真叶块 等 5 种外植体 , 分别接种到上述各培养基上 。有子叶柄 的进行插植接种 , 即把子叶柄插入培养基中2～3 mm , 无子叶柄的子叶块和真叶块平放于培养基上 。各处 理外植体数不少于 50 个 。待分化的不定芽长至 1. 5～