自制与进口肺炎衣原体单克隆抗体的特性比较.pdfVIP

维普资讯 中国临床医学 2007年 10月 第 14卷 第 5期 ClinicalMedicalJournalofChina，2007．Vo1．14，No．5 63l 论著 自制与进 口肺炎衣原体单克隆抗体的特性比较 王卫群 钱利生! 史益军。 李雪萍 白永怿 余竹元 摘要 目的：自制肺炎衣原体单克隆抗体(Cpn—McAb)与进 口Cpn—McAb的特性 比较及临床应用。方法 ：双 向琼脂扩散法鉴定 自制 Cpn—McAb的效价和 IgG亚型，用显色法检测单抗与 Cpn—MOMP的免疫反应 ，然后用异硫氰酸荧光素 (FITC)标记纯化 的IgG。为 了评估 Cpn—McAb，用 自制和进 口Cpn—McAb同时检测外周血标本 454例 。另外，分别从 Cpn特异性抗原(Cpn— Ag)阳性的外周血单核细胞(PBMC)标本(A组)中和 Cpn—Ag阴性的对照组(B组)中随机各挑选 4()例 ，用PCR检测 PBMC 中的Cpn—DNA。结果：免疫琼脂扩散结果表 明，Cpn单抗为 IgG2b亚型，扩散效价为1：128。在 1：3()工作浓度下，微量免疫荧 光检测的结果表明，自制 Cpn—McAb与鹦鹉热衣原体有较弱的交叉反应 ；与沙眼衣原体无交叉反应 ，特性与进 口Cpn—McAb 一 致。 自制Cpn—McAb检测 PBMC的 Cpn—Ag阳性 率为 53．3 (242／454)，进 口Cpn—McAb检坝4PBMC的阳性率为 52．6 (239／454)，两种单抗检测 同时阳性 的标本207例 ．Kappa值是 0．704，根据其判 断标准提示两者有较高的一致性 。A、B两组 Cpn—DNA 阳性标本分别为 38例和 2例 。结论 ：自制 Cpn—McAb几乎和进 口Cpn—McAb一样有较高的特异性和敏感性 ，有可 能替代进 口单抗用于临床 Cpn感染的检测 ．有助于相关疾病的诊治。 关键词 肺炎衣原体单克隆抗体 ； 微量免疫荧光 ； 外周血单核细胞 中图分类号 R563．1 文献标识码 A ComparisonofCharacteristicsbetween Self-madeand ImportedMonoclonalAntibodytoChlamydia Pneumoniae NG Weiqun QIANLisheng。 5HJViiUH LJXueping BAJYongyi ，L，ZhuyuaH。 1．Department ofcardiology，』inshanHospital，FudanUniversity，Shang’hai 200540； 2．Departmento／、MedicalMicrobiolo— gYandParasitology。ShangkaiM edicalCollege。FudanUniversity。S anghai 200032 Abstract objective：Tocomparethecharacteristicsbetweenself—mademonoclonalantibodytoChlamydiapneumoniae(Cpn— McAb)andCpn—McAbfrom USA，andclinicalapplicationofbothCpn—McAb．M ethods：ThetiterofCpn—McAbandIgG sub— classwereidentifiedbytwodimensionalimmunodiffusiontest，immunologicalreactionoftheantibodywithCpn—MOMP was testedbychromogenicmetod。thenpurifiedIgG waslabeledwithfluorescein isothiacyanate．InordertoevalutetheCpn—McAb． thebloodspecimensof454patientsweredetectedbyself—madeCpn—McAbandCpn—McAbfrom USA atthesametime．()nthe otherhand，werandomlyselected4()peripheralbloodmononuclearcell(PBM