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第 25 卷第 2 期 南 　京 　工 　业 　大 　学 　学 　报 Vol . 25 No . 2 2003 年 3 月 　　　　　　　 JOURNAL OF NANJ IN G UNIVERSITY OF TECHNOLOGY 　　　　　　　 Mar . 2003 TricineSDSPA GE 电泳分析小分子多肽 王 　旭 , 何冰芳 , 李 　霜 , 韦 　萍 , 欧阳平凯 (南京工业大学 制药与生命科学学院 ,江苏 南京 　2 10009) ( ) 摘 　要 : 研究旨在解决常规 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 PAGE 对一些小分子多肽进行电泳分析过程中极易扩散丢 失 ,常无着色带显示等问题 。实验采用不同类型胶来电泳分析低分子量多肽 , 比较 TricineSDSPAGE 电泳分析小分 子多肽时的聚丙烯酰胺浓度和交联度 ,为小分子多肽的分析与鉴定提供快速准确的条件 。 关键词 : TricineSDSPAGE ; 小分子多肽 ; 蛋白质 ( ) 中图分类号 : TQ93 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 :1671 - 7643 2003 02 - 0079 - 03 　　常规 Tris甘氨酸SDSPA GE 电泳分析分辨大分 模具为北京六一仪器厂生产 。 子物质的相对分子质量范围在 10～200 kDa ,对于相 1. 2 　方法 对分子质量小于 10 kDa 的多肽分辨率低[ 1] 。Swank 1. 2 . 1 　电泳贮存液的配制 　见表 1 和表 2 。 等在含有 SDS 的凝胶中加入 8 mol ·L - 1 的脲 ,但分离 表 1 　SDSPAGE 电泳缓冲液 效果不甚理想 , 且重现性较差 。Lanzillo 等发现在 Table 1 　Buffer solutions for SDSPAGE Laemmli 系统和仅在样品和电极缓冲液中有 SDS 的 c ( Tris) c ( Tricine) p H ρ( SDS) / (mol/ L) / (mol/ L) / (g/ mL) 不连续缓冲系统中 ,低分子量多肽常常堆积在浓缩 正极缓冲液 02 — 89 — 胶中[2 ] ,之后 Schagger 等[3 ] 又进行了系统地研究和 负极缓冲液 01 01 825 01 探索 ,能够分离较大相对分子质量范围内的蛋白质 。 凝胶缓冲液 30 — 845 03 随着生物技术的飞速发展和基因工程药物的大量涌 现 ,具有高生物活性的小分子多肽的分离 、纯化和鉴 表 2 　SDSPAGE 凝胶贮存液 定技术极为重要 。本文报道采用 TrisTricine 缓冲体 Table 2 　Stock solution