猪骨基多孔碳固定化酶的研究.pdfVIP

第34卷第2期 明 胶 科 学 与 技 术 V01．34．No．2 2014年 6月 TheScienceandTechnologyofGelatin Jun．2014． 猪骨基 多孔碳 固定化酶的研究 阮如玉’ 魏坤锐’ 王昱琳孙 1．北京化工大学理学院，北京，100029 2．北京化工大学材料科学与工程学院，北京，100029 摘要：本文以猪骨基多孔碳为载体，采用明胶 难以在工业 中得到更为广泛的应用 J。 包埋与戊二醛交联结合的方法，制备固定化过 如今，固定化酶技术已成为酶工程研究的 氧化氢酶，并对固定化酶制备条件的优化，酶 重点和热点 j。研究探索新的酶固定化技术、 作用最适条件及其稳定性进行研究。结果表 尽可能提高固定化酶载酶量与酶活性、增加固 明：以猪骨基多孔碳为载体吸附2h、1％ 明胶 定化酶的操作稳定性和贮存稳定性、并努力降 包埋、1％戊二醛交联过氧化氢酶制备的固定 低成本成为了固定化酶研究领域的主要研究 化酶，在最适的缓冲液浓度、溶液pH和体系温 内容。 度下，虽然催化效率有所下降，但其贮存稳定 猪骨基多孔碳具有比表面积高，吸附能力 性和操作稳定性都有所增加，重复使用 8次 强等特点，十分有利于酶的固定化 。明胶是 后，活力仍保持在初始活力的90％ 以上。这 一 种天然高分子材料，由动物的骨、生皮、肌 对于过氧化氢酶进一步在食品工业和纺织工 腱、膜等组织中所含的胶原水解制得。加之明 业的推广可能有潜在的应用价值。 胶提取于生物组织，同时具有无抗原性、良好 的生物相容性和可降解性，为其在固定化酶方 关键词：固定化酶；多孔碳；明胶；过氧化氢酶 面的应用提供了良好的性能基础 。。。戊二 醛是一种具有双功能基团的交联剂，同时提高 1 前言 固定化酶稳定性和耐压强度。本实验中充分 过氧化氢酶是动物组织中一种很常见的 利用了比表面积高、吸附能力强的天然猪骨基 酶，可将过氧化氢催化分解成氧气和水 J。过 多孔碳作为固定化酶的载体，与具有适宜生物 氧化氢酶在各个工业领域的应用很广泛，在食 相容性的明胶包埋固定化酶的技术相结合，并 品和乳制品工业 中常被用来除去奶酪制造前 采用戊二醛试剂交联制备了性能优 良的固定 进行牛奶杀菌消毒后残余的过氧化氢，在烘烤 化过氧化氢酶。 食品过程 中利用过氧化氢酶分解过氧化氢产 2 实验部分 生的氧气起到疏松作用；在造纸工业中，用过 2．1 实验原料及试剂 氧化氢漂白代替传统的含氯漂白方法，用过氧 实验原料及试剂见下表 1。 化氢酶去除多余的过氧化氢；在环保方面，用 2。2 实验仪器及设备 过氧化氢和过氧化氢酶处理工业废水和生物 主要实验仪器及设备见下表2。 过滤器 J。但游离的过氧化氢酶有不稳定、 2．3 实验 方法 容易变性失活、提取难和成本高等缺点，使其 2．3．1 猪骨基多孔碳 固定化载酶量的测定 } E-mM1：wy120083@ 163．com 第34卷第2期 阮如玉等：猪骨基多孔碳固定化酶的研究 ·85 · 其他试剂均为国产分析纯产品 表2 主要实验仪器及设备 名称 生产厂家 FA2004B型分析天平 上海精密科学仪器有限公司 LGJ一12冷冻干燥箱 北京机源华兴科技发展有限公司 UV2000紫外分光光度