真空冻干过程对谷氨酸短杆菌的影响.pdfVIP

第21卷第4期 广西工学院学报 V01．21No．4 OF 2010年12月 JOURNALGUANGXIUNIVERSnY0FTECHNOLOGY Dec．2010 文章编号10(O-6410(2010)04．0069-03 真空冻干过程对谷氨酸短杆菌的影响 黄 瑶，黄翠姬，廖 兰，廖春燕，梁晓惠 (广西工学院生物与化学工程系，广西柳州545006) 摘要：为研究真空冷冻干燥过程对谷氨酸短杆菌TG866的影响，通过对冷冻干燥前后的谷氨酸菌种的生理生化特 性、发酵能力进行比较研究．实验结果表明：冷冻干燥前后菌种的生理生化特性未发生改变，菌种发酵能力受冻干过程 影响不大． 关键词：真空冷冻干燥；谷氨酸；生理生化特性；发酵 中国分类号：Q815 文献标志码：A 0引言 发酵生产所用菌种的有效保藏是稳定发酵产酸率和糖酸转化率的前提，由于谷氨酸菌种极易感染杂 菌和噬菌体，同时也容易发生衰退与老化从而影响菌种的性状和发酵产酸能力，目前，国内对谷氨酸菌种 的保藏方法报道较少．实验室中仍多使用常用的斜面低温保藏法[1]．冷冻干燥保藏法以其适用范围广、保存 期长和存活率高的特点应用于诸多菌种【2]，可使所保藏菌株保存10年以上，且只需供给水分菌株即可再 生。在生产上十分方便，其保藏效果也较其它方法具有较大的优势[3]．本文研究真空冷冻干燥过程对L．谷氨 酸菌种的影响。探讨快速下降的温度和湿度对己一谷氨酸生产菌种谷氨酸短杆菌的性能和发酵能力是否造 成影响．为谷氨酸菌种的保藏提供参考． 1材料和方法 1．1菌种 广西工学院发酵工艺实验室斜面保藏菌种谷氨酸短杆菌TG866． 1．2培养基 2．5 (1)活化斜面：葡萄糖10r,／L，牛肉膏10g／L，蛋白胨10g／L，酵母膏5rdL，NaClg／L，琼脂15rdL， pH值为7．0． (2)一级种子培养基：葡萄糖26g／L，玉米浆40 0．8g／L，尿素8 g／L，K2HP041．4g／L，MgS04 g／L，pH值为 7．O． 3．5 1 0．8 (3)摇瓶发酵培养基：葡萄糖80 g／L，KH2P04 g／L，K2HP04 g／L，MgS04g，L，尿素8rdL，pH值为 7．2． 1．3真空冷冻干燥菌种‘4】 将已灭菌的浓度为20％的脱脂牛奶直接加到待保藏的菌种斜面内，用接种环将菌种刮下，然后用旋涡 混合器混合，使其均匀地悬浮在牛奶内成悬浮液；用无菌毛细管吸取0．2IIll制备好的菌悬液插到安瓿管底 部进行分装，将分装好的安瓿管先放置到4℃冰箱中预冻25min。再放置到一18℃的冰箱中预冻25nain。 收稿日期：2010-04-30 基金项目：广西工学院科学基金项目(院科自0704214)资助． 作者简介：黄瑶。研究方向：生物技术。E-mail：ayaoql2004@163．eonL． 万方数据 70 广西工学院学报 第21卷 最后在低温冰箱(约_40℃)中预冻25min；转移至已预冻至一50℃的真空干燥器中启动真空泵抽气直至样 品干燥，将干燥完全的安瓿管安装在循环水式真空泵上抽真空，当真空度达到最小值并稳定，继续保持 5rain：最后用酒精喷灯熔封安瓿管． 1．4培养方法 (1)活化斜面菌种培养：32℃培养24h． dmin、32 (2)一级种子培养：在240 oc的条件下摇瓶培养约8h，测定OD值净增O．5以上，便可接到 摇瓶发酵培养基中培养．