从动物血液中提取基因组DNA方法的比较研究.pdfVIP

第 28 卷第 4 期 ( ) 辽宁师范大学学报 自然科学版 Vol . 28 　No . 4 2005 年 12 月 　　　　　 ( ) 　　　　　 J ournal of Liaoning Normal U niver sit y Nat ural Science Edition Dec . 　2005 　　文章编号 (2005) 从动物血液中提取基因组 DNA 方法的比较研究 1 ,2 1 2 1 逄洪波 , 　陈永燕 , 　张恒庆 , 　周其兴 ( 1. 大连大学 生物工程学院 ,辽宁 大连 　116622 ; 2 . 辽宁师范大学 生命科学学院 ,辽宁 大连 　116029) 摘 　要 :从血液中提取基因组DN A 的传统方法是先得到淋巴细胞 ,再用蛋白酶 K 、SD S 消化 ,然后用酚 、氯仿抽提 , 乙 醇沉淀. C TAB 法提取基因组 DN A 多应用于植物和微生物 ,从全血中提取基因组 DN A 报道甚少. 采用改良的 C TAB 法从全血中提取基因组 DN A , 并以传统方法和 TA KA RA Blood Genome DN A Ext raction Kit 作对照. 结果表明: C TAB 法可以得到大量的、较完整的基因组 DN A ,并且纯度达到 1. 8～2 . 0 ,可以满足 PCR 扩增和限制酶切等实验的 要求. 关键词 :血液 ;C TAB 法 ;DN A 提取 ; PCR 分析 中图分类号 :R3 　　　文献标识码 :A 获得基因组 DN A 是进行后续分子生物学研究的基础 ,寻找合适的DN A 提取方法是开展大多数分 子生物学实验所面临的第一个问题. 从血液中提取基因组 DN A 的方法大都是先得到淋巴细胞 ,再用蛋 ( ) 白酶 K 、十二烷基硫酸钠 SD S 消化 ,然后用酚 、氯仿抽提 , 乙醇沉淀. 该种方法的不足之处在于程序繁 琐 、耗时 ,而且蛋白酶 K 也比较昂贵. C TAB 裂解提取法常用于新鲜植物组织的 DN A 提取. 近年来 , [ 1] [2 ] ( ) C TAB 法也逐步应用于动植物标本和化石 DN A 的提取 . 刘波等 用 C TAB 法分别对稻蝗 Oxya 的 [ 3 ] 干标本和酒精浸泡标本的DN A 进行提取并获得了满意结果. Yang 等 用 3 种方法提取了 Probo scide an 的化石和馆藏标本的DN A ,也认为用 C TAB 法提取化石 DN A 的成功率最高. 但是用 C TAB 方法从 动物全血中提取基因组 DN A 报道甚少. 本研究的目的在于寻找一种可以获得高质量 ,但耗费时间少 、 程序简单 、节约药品的血液 DN A 提取方法. 1 　材料和方法 ( ) [4