狂犬病毒疫苗株和中国街毒株的比较研究.pdfVIP

狂犬病毒疫苗株和中国街毒株的比较研究 孟胜利1 徐葛林1 程满荣1 吴杰1 明平刚1 明贺田2 朱风才3 周敦金4 王定明5杨晓明‘ 严家新1 1．武汉生物制品研究所，武汉，430060；2．阜阳市疾病控制中心，阜阳，236006； 3．江苏省疾病控制中心，南京，210009；4．武汉市疾病控制中心，武汉，430022； 5．贵州省疾病预防控制中心传染病防治所，贵阳，550004 【摘要】目的分析中国狂犬病毒街毒的遗传学特征，了解中国狂犬病毒的流行株与中国人用、兽用 狂犬病疫苗株的在G基因核苷酸和氨基酸水平的差异，为有效控制狂犬病疫情初步科学依据。方法在 1985--2006年间，我们实验室从全国各地共分离到46株街毒株，其中从犬脑中分离到4l株，人脑中分离到4 株，鹿脑中1株。以免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验检测狂犬病毒抗原，阳性样品提取RNA，反转录后特异 序列分析表明本实验所 性扩增病毒G基因序列，测序后用MEGA生物信息学软件进行遗传学分析。结果 分离的39株中国狂犬病毒和其它研究者分离的17株中国狂犬病毒均为基因I型狂犬病毒；其中具有代表性 的8株病毒与我国现在使用的各种疫苗株在G基因的核苷酸和氨基酸水平上均存在不同程度的差异，与我国 人用疫苗株CTN同源性较高；进化分析表明，我国主要流行狂犬病毒与泰国、印度尼西亚、马来西亚等东南亚 狂犬病毒株处于同一分支。结论我国的狂犬病毒为基因I型狂犬病毒，可以明确分为5个进化群；这些街 毒株G基因核苷酸同源性≥87％，氨基酸同源性93．8％；街毒株G基因与疫苗株相比较核苷酸的同源性在 79．6％和94．3％之间，氨基酸的同源性在82．3％和97．7％之间；同时我们发现无论在核苷酸还是氨基酸水平 上，疫苗株CTN与代表街毒株间的差异要小于其它疫苗株(aG、PM和PV)和代表街毒株间的差异，我们也有必 要进一步研究疫苗株与街毒株抗原性方面的差异。 【关键词】狂犬病毒；分子流行病；G基因；中国 回顾过去57年(1950--2006年)间，中国共报告RABV为单股不分节段的负链RNA病毒，病病 狂犬病死亡人数114，164人，已形成四个发病高 峰[6]。整个50年代狂犬病死亡人数达7200多例， 5 60年代全国共死亡人数达6200多例，70年代总死7)：核蛋白N、磷蛋白P、基质蛋白M、糖蛋白G和多 亡人数达20000多例，80年代我国的狂犬病流行最聚酶蛋白L。病毒颗粒由外壳和核心两部分组成， 是有囊膜的病毒，囊膜为脂双层膜与包膜基质蛋白 为严重，1984年全国24个省市报告病例数为6018 例，死亡6017例[4J。但随着国家控制狂犬病相应政M组成，其表面有糖蛋白G形成的棘突，囊膜内的 策的纷纷出台，在疫区大面积灭狗，从1987年起狂 犬病疫情出现了明显回落，从卫生部公布的狂犬病 毒的RNA及核蛋白N，磷蛋白P以及L聚合酶共同 疫情统计显示，至1996年，人狂犬病步入发病低谷．构成，M蛋白将Nc和病毒脂双层外膜连接起来。 全国狂犬病死亡总人数由1990年3520例下降到G蛋白是一种同源三聚体跨膜糖蛋白，在RABV外 1996年158例[4]，之后随着养犬热的进一步升温，疫 0|，它含有可被宿主细胞识别 壳上形成刺突(spikes)n 情逐年严重，到1999年全国狂犬病的发病死亡人数的结构域[I¨3|，同时与RABV的嗜神经性和致病性 相关∽‘6|。 达343例【7】。在1996年，每10万人的发病数为 RABVG基因编码524个从，在肽链的氨基端， 0．013，而2002年和2003年，每10万人的发病数分