3第三章液相色谱.pptVIP

二、液相色谱的特点 1.高压：流动相的压力很大，一般为150～350×105Pa 2.高速：1ml· min-1～10ml min-1 3.高效：理论塔板数3×104（气相色谱约2×103） 4.高灵敏度：灵敏度取决与检测器 5.高分析能力：有机物的70％～80％ 三维立体影像 4. 热学性质检测器： （1）光声检测器 （2）热透镜和光热偏转检测器 1.固定波长紫外吸收检测器：低压汞灯提供固定254nm或280nm紫外光。 2.可变多波长检测器：氘灯做光源，光栅分光 3.光二极管阵列检测器photo－diode－array detector（PDAD，PDA, DAD）：钨灯和氘灯组合光源，进入检测池的不是单色光，而是一段紫外波长上的光。 PDA 可以辅助定性。 传统的紫外与二极管阵列检测的不同 传统的紫外光学设计 二极管阵列紫外设计 Source Entrance slit Concave grating Diode-array detector Flow cell Source Entrance slit Exit slit Flow cell Detector Concave grating 二极管阵列检测器 扫描模式 所有谱图 所有峰扫描 高于基线三倍时扫描 单纯峰扫描 Absorbance Time Wavelength * * * The primary advantage of a diode-array detector is that it can gives you full 3D information in the absorbance, time and wavelength domains. This extensive information is invaluable for qualitative analysis. Whilst a 3D plot like this looks very attractive extracting useful information productively requires an appropriate set of tools. When you dont need all the spectra you can choose other spectral, acquisition modes such as all in peak, 3 in peak or apex only to give smaller data files. 第三章 高效液相色谱法 一、液相色谱与气相色谱的差异： 1.流动相差异： 溶质在液体中的扩散系数比它在气体中小105倍左右，液体粘度比气体约大100倍，液体表面张力比气体大104倍左右，液体密度比气体约大103倍，液体不可压缩 2.担体的差异： 气相色谱填充柱，一般担体粒度为80-100目，直径大约是2毫米，而一般液相色谱的固定相粒度在2－10微米，因此流动相通过时产生很大的阻力 3.柱效的差异： 同样长度的柱子，液相色谱柱的理论塔板数要大的多 通常所说的高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography) 也是高压液相色谱(High Pressure Liquid Chromatography) 三、液相色谱的种类 1. 吸附色谱： （1）特点： 一般也把吸附色谱法称为液固色谱法。固定相一般为固体吸附剂，常用的有碳酸钙、硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭等。其中硅胶最为常用。 吸附色谱对中等分子量的油溶性样品可获得最佳的分离，而对强极性或离子型的样品，有时会发生不可逆吸附，不能得到满意的结果。 （2）分离原理： 吸附剂一般为多孔性的物质，溶质分子和流动相分子在吸附剂表面的活性中心上进行竞争，竞争的结果形成溶质在吸附剂表面吸附、解吸平衡。 X表示溶质分子，下标m为流动相，s为固定相，M表示流动相分子，s为固定相，n为被溶质分子取代的流动相分子数目 表示如下： 吸附 解吸 极性吸附剂上有机化合物的保留顺序如下： 氟碳化合物饱和烃 烯烃芳烃有机卤化物醚硝基化合物腈叔胺酯醛酮醇伯胺酰胺羧酸磺酸 2. 键合相液相色谱 键合相固定相：在硅胶的表明用键合反应把官能基团键合到表面上，解决固定相流失的问题。 正相色谱：流动相极性比固定相极性小 反相色谱：流动相极性比固定相极性大 3. 分配色谱 4. 离子交换色谱 5. 离子对色谱 6. 空间（体积）排阻色谱 四、液相色谱的流动相 1.反相色谱最常用的流动相： （1）水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、异丙醇等。 （2