光度分析法的误差.pptVIP

7.3 光度分析法的误差 1 对朗伯-比尔定律的偏离 2 吸光度测量的误差 7.3 光度分析法的误差 1 对朗伯-比尔定律的偏离 在吸光光度分析中，经常出现标准曲线不呈直线 的情况，特别是当吸光物质浓度较高时，明显地看到 通过原点向浓度轴弯曲的现象(吸光度轴弯曲)。这种 情况称为偏离朗伯-比尔定律。若在曲线弯曲部分进行 定量，将会引起较大的误差。 偏离朗伯－比尔定律 的原因主要是仪器或溶液 的实际条件与朗伯-比尔定 律所要求的理想条件不一致。 7.3 光度分析法的误差 （1）非单色光引起的偏离 * 朗伯-比尔定律只适用于单色光，但由于单色器色散能力的限制和出口狭缝需要保持一定的宽度，所以目前各种分光光度计得到的入射光实际上都是具有某一波段的复合光。由于物质对不同波长光的吸收程度的不同，因而导致对朗伯－比尔定律的偏离。 7.3 光度分析法的误差 * 克服非单色光引起的偏离的措施 ◎ 使用比较好的单色器，从而获得纯度较高的 “单色光”，使标准曲线有较宽的线性范围。 ◎ 人射光波长选择在被测物质的最大吸收处，保证测定有较高的灵敏度，此处的吸收曲线较为平坦，在此最大吸收波长附近各波长的光的ε值大体相等，由于非单色光引起的偏离要比在其他波长处小得多。 ◎ 测定时应选择适当的浓度范围，使吸光度读数在标准曲线的线性范围内。 7.3 光度分析法的误差 （2）介质不均匀引起的偏离 朗伯－比尔定律要求吸光物质的溶液是均匀的。如果被测溶液不均匀，是胶体溶液、乳浊液或悬浮液时，入射光通过溶液后，除一部分被试液吸收外，还有一部分因散射现象而损失，使透射比减少，因而实测吸光度增加，便标准曲线偏离直线向吸光度轴弯曲。故在光度法中应避免溶液产生胶体或混浊。 7.3 光度分析法的误差 （3）由于溶液本身的化学反应引起的偏离 溶液中的吸光物质常因解离、缔合、形成新化合物或互变异构等化学变化而改变其浓度，因而导致偏离朗伯—比尔定律。 A 解离 大部分有机酸碱的酸式、碱式对光有不同的吸收性质，溶液的酸度不同，酸(碱)解离程度不同，导致酸式与碱式的比例改变，使溶液的吸光度发生改变。 B 络合 显色剂与金属离子生成的是多级络合物，且各级络合物对光的吸收性质不同，例如在Fe(Ⅲ)与SCN-的络合物中，Fe(SCN)3颜色最深，Fe(SCN)2+颜色最浅，故SCN-浓度越大，溶液颜色越深，即吸光度越大。 7.3 光度分析法的误差 c 缔合 例如在酸性条件下，CrO42-会缔合生成Cr2O72-，而它们对光的吸收有很大的不同。 在分析测定中，要控制溶液的条件，使被测组分以一种形式存在，以克服化学因素所引起的对朗伯－比尔定律的偏离。 7.3 光度分析法的误差 2 吸光度测量的误差 在吸光光度分析中，仪器测量不准确也是误差 的主要来源。任何光度计都有一定的测量误差。这 些误差可能来源于光源不稳定，实验条件偶然变动， 读数不准确等。 在光度计中，透射比的标尺刻度均匀。吸光度标 尺刻度不均匀。对于同一仪器，读数的波动对透射 比为一定值；而对吸光度读数波动则不再为定值。 吸光度越大，读数波动所引起的吸光度误差也越大 7.3 光度分析法的误差 透射比很小或很大时，浓度测量误差都较大，即 光度测量最好选吸光度读数在刻度尺的中间而不落两 端。待测溶液的透射比T在15%~65%之间，或使吸光 度A在0.2~0.8之间，才能保证测量的相对误差较小。 当A=0.434(或透射比T=36.8%)时，测量的相对误 差最小。 7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用 1 示差吸光光度法 2 双波长吸光光度法 3 弱酸和弱碱解离常数的测定 4 络合物组成的测定 7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用 1 示差吸光光度法（differential） （1）示差吸光光度法的原理 吸光光度法一般仅适用于微量组分的测定，当待测定组分浓度过高或过低，会引起很大的测量误差，导致准确度降低。示差吸光光度法可克服这一缺点。目前，主要有高浓度示差吸光光度法、低浓度示差吸光光度法和使用两个参比溶液的精密示差吸光光度法。它们的基本原理相同，且以高浓度示差吸光光度法应用最多，仅介绍高浓度示差吸光光度法。 7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用 吸光度差与这两种溶液的浓度差成正比。以把 空白溶液作为参比的稀溶液的标准曲线作为ΔA和 Δc的标准曲线，根据测得的ΔA求出相应的Δc值， 从cx=co+c可求出待测试液的浓度，这就是示差吸 光光度法定量的基本原理。 7.4 其他