光栅型荧光分光光度方法通则0025.pdfVIP

MV_RR_CNJ_0025 光栅型荧光分光光度方法通则 1. 光栅型荧光分光光度方法通则的说明 编号 JY/T 025—1996 名称 (中文) 光栅型荧光分光光度方法通则 (英文) General rules for grating fluorescence spectrophotometry 归口单位 国家教育委员会 起草单位 国家教育委员会 主要起草人 田笠卿 批准日期 1997 年 1 月 22 日 实施日期 1997 年 4 月 1 日 替代规程号 无 适用范围 本通则规定了一般样品(液体、固体)中的金属和有机成分的荧光 分光光度分析方法，适用于食品、卫生、农业、环境等方面的一些样 品分析。 主要技术要求 1.定义 2.方法原理 3.试剂和材料 4.仪器 5.样品 6.分析步骤 7.分析结果的表述 是否分级 无 检定周期(年) 附录数目 1 出版单位 科学技术文献出版社 检定用标准物质 相关技术文件 备注 2. 光栅型荧光分光光度方法通则的摘要 本通则规定了一般样品(液体、固体) 中的金属和有机成分的荧光分光光度分析方 法，适用于食品、卫生、农业、环境等方面的一些样品分析。 2 定义 2.1 荧光物质 fluorescence material 能显示或易察觉荧光的分子称作荧光物质，通常指具有刚性结构和平面结构的π电子共 轭体系的分子或带有共轭双键的分子。 2.2 荧光发射光谱EM fluorescence emission spectrum 选择某一固定波长的光激发样品，记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数 关系，即得荧光发射光谱。 2.3 荧光激发光谱EX fluorescence exitation spectrum 选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数，即得荧光激发光谱。 2.4 校正光谱 calibration spectrum 由于荧光测量仪器的特性，例如光源的能量分布、单色器的透射率和检测器的响应等性 能会随波长而变，所以同一化合物在不同的仪器上会得到不同的光谱，且彼此间无类比性， 这种光谱称为“表观”光谱，要使同一化合物在不同仪器上能得到具有相同特性的荧光光谱， 则需要对仪器的上述特性进行校正，经过校正后的光谱称为校正荧光光谱(亦称真正的荧光 光谱)。 3 方法原理 物质被某一波长的光照射后，会发射出比照射波长稍长的光，这种光称为荧光，它的过 程是当物质的分子处于基态时，吸收光后，可跃迁到激发态，各激发态分子相互撞击而以无 辐射能量损失的形式回到第一激发态的最低振动能级，这一振动能级的分子在返回基态时， 所发射的光称为荧光；但当它转入亚稳的三重线级，停留一段时间，返回至基态时所发出的 光称为磷光，荧光(磷光)与物质浓度的关系为 ε F ＝K ’ LC ϕI (1 －e ) 0 式中 F ——荧光强度 K ’——仪器常数 ϕ ——量子效率 I0 ——激发光强度 ε——荧光物质的摩尔吸收系数 L——荧光池厚度 C——荧光物质浓度 对于给定的物质来说，当激发光的波长、强度、荧光池厚度一定，浓度较低时，上述关系可 以简写为 F