利用PCR技术快速检测水产品中副溶血性弧菌.pdfVIP

安徽农业科学,Journal of Anhui Agri . Sci .2009 ,37( 15) :6909 - 6910 ,6913 责任编辑 张彩丽 责任校对 卢瑶 利用PCR 技术快速检测水产品中副溶血性弧菌 * 王豪, 孙晓红 ( 上海海洋大学食品学院, 上海201306) 摘要 [ 目的] 对副溶血性弧菌的检测进行研 究。[ 方法] 采 用聚合酶链 式反应( PCR) , 以标准菌株( 单增李斯特菌、哈 氏弧菌) 作为 阴性对 照对3 株副溶血性弧菌进行特异性扩增, 扩增 引物采 用副溶血性弧菌tl h 基 因中的tlh-3 和tlh- 4 , 同时利用PCR 对人工 污染的 白对虾 中 的副溶血性弧菌进行检 出限测定。[ 结果] 结果表明, 通过PCR 扩增, 副溶血性弧菌在约449bp 处扩增 出特异性条带, 单增李斯特菌、哈 氏 2 弧菌均未 出现任何条带, 扩增片段表现出极好 的特异性。菌液稀释 到3 .3 ×10 cfu/ ml 时, 将其污染到 白对虾 中作PCR 仍可扩增 出 目的 片断。[ 结论] 该研 究表 明PCR 检测方法快捷 、特异性好 、敏感性高, 可 以作为副溶血性弧菌辅助检测方法。 关键词 副溶血性弧菌;PCR ; 检 出限 中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517 - 6611(2009) 15 - 06909 - 02 Rapid Detection of Vibri o par ahae molyti cus in Aquatic Products by PCR Technology WANG Hao et al ( Food College of Shanghai Ocean University ,Shanghai 201306) Abstract [ Obj ective] The research ai med to study the detection of Vibri o par ahaemolyti cus . [ Method] Three V . par ahaemolyticus strai ns were specially amplified by PCR ,and the standard referenced strains used for negative comparison were Li st eri a monocytogenes and V . harveyi .The pri mers of amplifica- tion were tlh-3 and tlh- 4 gene in V . par ahaemolyticus .At the same ti me ,detection li mits of manual contaminated prawns were deter mined with PCR .[ Re- sult] The results showed that , V. par ahaemolyti cus amplified special segment in 449 bp but L . monocyt ogenes and V. harveyi didn’t .The amplified segment 2 perfor med splendiferous specialty .By PCR amplification ,the ai med sni ppet could be also amplified when bacteria solution was diluted to 3 .3 ×10 cf u/ ml and contaminated to prawns .[ Conclusion] This research p