海洋哺乳动物的病毒病.docVIP

海洋哺乳动物的病毒病（Viral Diseases in Marine Mammals） Suzanne Kennedy--stoskopf 病毒分离的概况（Virus Isolation-An Overview） 病毒（Viruses）在排除其他容易分离到的病原体的基础上常常被认为是致病因子。一旦细菌（bacteria）、真菌（fungi）和寄生虫（parasites）在鉴别诊断中被排除，则适合病毒分离的材料常常不再具有活性，如具有活性则不再具有传染性。如对照血清显示对某病毒的抗体滴度升高，则表明动物有该病毒的感染。但这只是间接性的证据，因此不能做出最后定论。诊断一个病毒感染至少应用电子显微镜显示病毒粒子，最好的办法是分离病毒进行适当的鉴定，病毒是否真正造成疾病比较容易解释，并且能通过实验接种重新复制临床症状和病理变化予以验证。然而，该方法是不实际的，并且有时因有其他病因（在实验条件下不能复制）能影响病毒的致病性而不能得出结论。 某些临床症状明显的说明病毒是致病因子。大量动物由于急性死亡就是一个例子，比如发生于新英格兰海岸流行于点班海豹（harbor seal）中，由流感病毒A引起的疫病和在北欧由疱疹病毒（herpesvirus）引起动物大量急性死亡就是很好的例证。另外一个例子是在鲸类动物中，与痘病毒（poxvirus）有关的皮肤病变在临床上得到了复制。 用于病毒分离的病料有皮肤病变组织、肺、肝、肾、脾、异常的淋巴结和脑组织，采集病料时应尽可能无菌操作，各个样品应置于塑料袋里于-70℃保存，但大家一致认为该方法在临床上不实用，除非事先采取预防措施。在病料运送到超低温冷冻器之前，可用含有冰块的容器保存6-12小时，样品应可能小，以便对样品进行速冻。 有时，从活组织中分离出的病毒比较好，这就需要与实验室进行密切合作。并由实验室提供运输组织样品的运输媒介，用抗菌素和抗真菌药物强化处理的组织培养基和缓冲盐溶液被用于在冰中的环境中保存样品可达到24小时。在大多数实验室受限制的因素是缺乏海洋哺乳动物细胞，以便用组织均桨进行接种，这些实验室寄希望于海洋哺乳动物分离的病毒能在来自其他动物种类的细胞上生长，或者能在那些组织样品细胞上进行病毒的生长和复制，该方法已被成功地用于萼病毒（calcivirus）和流感病毒A（influenza A virus），但在腺病毒和疱疹病毒（adeno and herpes virus）还没取得成功。 假如病毒没有被分离出来，被保存的样品可作电子显微镜观察,以检查病毒粒子（viral particles），尽管用福尔马林固定的（Formalin fixed）组织能显示出病毒的超微结构，但最好用戊二醛（glutaraldhyde）进行固定一观察其形态学结构。还有一个限制因素就是冰，因为大多数固定后的组织用于电子显微镜的观察需要冷冻，假如样品在现场采集时不能进行理想的固定，则可将组织样品在转到3%戊二醛溶液里之前储藏于塑料袋或将其包起来放于铝盒里储藏于冰里面保存4--6小时。样品应小于1mm2以便用戊二醛进行适当的固定，假如样品不能冷冻保存或不能迅速转移到戊二醛溶液中，则可用福尔马林（Formalin）进行固定。 痘病毒（Poxvirus） 宿主范围（Host range） 痘病毒已在数种鳍脚类动物皮肤病变组织中进行过形态学的分离鉴定，这些鳍脚类动物包括加州海狮（Zalophus californianus），南美海狮（Otaria byronia），点斑海狮（Phoca vitulina），灰海豹（Halichoerus grypus）和海狗（Callorhinus ursinus），痘病毒也和大西洋瓶鼻海豚（Tursiops truncatus）和搁浅的白腰斑纹海豚（Lagenorynchus acutus）的皮肤病变相关联，该病毒对人工饲养的和自由生活的鳍脚类动物以及鲸类动物都感染。 临床症状（Clinical signs） 在鳍脚类动物中，该病毒引起的皮肤病变的分布基本相似，其中包括头、颈和鳍肢，在点斑海豹和灰海豹，开始在皮肤出现直径0.5--1cm突出皮肤的结节，接近一周后，这些结节增加到1.5--3cm（见图1），在第二周，这些病变破亏，在点斑海豹则可有化脓现象，同样在第二周，病变迅速扩散，在点斑海豹中，该病毒在开始形成的结节周围形成卫星样分布的皮肤病变，尽管在点斑海豹中这些结节可持续15--18周，但一般在四周后这些皮肤病变在这两种海豹中开始消退，在疾病康复后可能会留下脱毛区和瘢痕组织。 在海狗和许多南美海狮中，皮肤结节是溃疡性的，而在加州海狮则结节既可以是溃疡性的，又可以是非溃疡性的。在两只南美海狮中，这些皮肤结节曾出现过不定期地分布在全身体表的现象。 在鲸类动