GB/T 5009.171-2003保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定.pdf

ICS67.040 C 53 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T5009.171-2003 保健食品中超氧化物歧化酶(SOD) 活性的测定 Determinationoftheactionofsuperoxidedismutaseinhealthfoods 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部 .* 中 国国家标准化管理 委员会 a,l. Gs/T5009.171-2003 前 言 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准负责起草单位:吉林市卫生防疫站、吉林医学院。 本标准第一法主要起草人:袁彦华、罗速、于敬伟、孙连军、赵凤明。 本标准第二法主要起草人:罗速、袁彦华、张吉林、卢忠魁。 GB/T5009.171--2003 引 言 超氧化自由基 (〕艺可以造成机体细胞损伤 超氧化歧化酶(SOD)能够清除机体内O; 。食品中 SOD活性的测定，国内外尚无标准检验法。因此，卫生部九五制标规划确定了食品中SOD活性测定的 研究课题。 本标准以修改的Marklund方法和化学发光法测定食品中SOD活性。前者SOD活性测定最低检 出浓度为 1.17U/mL，相当于 1.1X10-smol/L，方法灵敏，仪器价廉，操作简单，易于推广;后者SOD 活性测定最低检出浓度为0.033U/mL，相当于3.0X10-0mol/L，灵敏度比前者提高约二个数量级。 具有更加灵敏、快速和干扰少等优点，但试剂较贵，可应用于仲裁或科研。两种测定方法对同一SOD酶 测定结果无显著差异(P0.05)o GB/T5009.171-2003 保健食品中超氧化物歧化酶(SOD) 活性的测定 范围 本标准规定了食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定方法。 本标准适用于各类食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定。 本方法第一法检出限1.17U/mL;第二法检出限0.033U/mL. 第一法 修改的Marklund方法 2 定义 25℃时抑制邻苯三酚自氧化速率50%时所需的SOD量为一个活力单位。 3 原理 在碱性条件下，邻苯三酚会发生自氧化，可根据SOD抑制邻苯三酚自氧化能力测定SOD活力。 4 试荆 4.1A液:pH8.200.1mol/L三轻甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲溶液(内含 1mmol/LEDTA 2Na). 称取1.2114gTris和37.2mgEDTA ·2Na溶于62.4mL0.1mol/l,盐酸溶液中，用蒸馏水定容至 100mL. 4.2 B液:4.5mmol/I邻苯三酚盐酸溶液。称取邻苯三酚(A.R)56.7mg溶于少量 10mmol/L盐酸 溶液，并定容至100mL. 4.3 10mmol/L盐酸溶液。 4.4 0.200mg/mL超氧化歧化酶(SOD). 4.5 蒸馏水 :二重石英蒸馏水 。 5 仪器 5.1紫外一可见分光光度计。 5.2 精密酸度计，精确度 。.OlpH. 5.3 离心机。 5.4 10mL比色管。 5.5 10mL离心管。 5.6 玻璃乳钵。 6 试样的制备 6.1 固体样品(茶、花粉等)称取 1.00g样品置于玻璃乳钵中，加人9.0mL蒸馏水研磨5min，移人 10mL离心管。用少量蒸馏水冲洗乳钵，洗涤并人离心管中，加蒸馏水至刻度，经4000r/min离心 15min，取上清液测定。 6.2 澄清液体样品可取原液直接测定，浑浊液体样品经4000r/min离心15min，再取上清液测定