A群猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条的研制.pdfVIP

中国兽医科学 2008，38(11)：952956 ChineseVeterinaryScience 中图分类号 ：S852．659．4 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673—4696(2008)11_0952—05 A群猪轮状病毒胶体金免疫层析试纸条的研制 刘兆磊 ，马广鹏 ，姜艳平 ，畅 丹 ，李一经 (1．东北农业大学 动物医学院，黑龙江 哈尔滨 l50030； 2．哈尔滨市动物卫生防疫站，黑龙江 哈尔滨 150016) 摘要 ：为建立一种快速、简便的猪轮状病毒检测方法，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记纯 化的抗猪轮状病毒 VP6蛋白单克隆抗体。在硝酸纤维素膜上喷加纯化的抗猪轮状病毒 VP6蛋白多克隆抗 体和羊抗鼠IgG，制成检测猪轮状病毒抗原的胶体金免疫层析试纸条。结果表明，所制备 的试纸条用于检测 猪轮状病毒感染的MA104细胞培养物，在检测线处 出现红色反应带，未感染病毒的细胞培养物在检测线处 未出现反应条带，上述培养物在质控线处均出现红色反应条带；进一步试验表 明，试纸争检 出病毒培养液 (TCIDso是 1O一 0．1mI)的最低限为 l：32稀释；用不 同批 次的试纸条重复检测，结果无差异；该试纸条 不与相关的腹泻病毒猪传染性 胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒发生反应，所制备的试纸条具有一定的敏感性和 特异性，重复性 良好。 关键词 ：猪轮状病毒；胶体金 ；免疫层析 ；试纸条 Developmentofcolloidalgold immunochromatographicteststrip fordetection ofporcinerotavirusGroupA IIU Zhaolei’!，MAGuangpeng ，JIANG Yan—ping．CHANGDan ，I．IYi—jing (1．Colleg o厂VeterinaryMedicine．NortheastAgri~’ulturafUniversify，Harbin150030，China； 2．AnimalEpidemicPrezJelztio7Station。，Harbin．Harbin150016．China) Abstract：Todeveloparapidandsimpleassayfordetectionofporcinerotavirus(PRV)，colloidalgold particleslabeledwithpurifiedmonoclonalantibodyagainstPRV VP6proteinwerepreparedbyreductionof sodium citrate．ThepurifiedpolyclonalantibodiesagainstPRV VP6proteinandgoatantimouseIgG were solidifiedtonitrocellulosefiltertopreparethe colloidalgold immunochromatographicstrip．M A104 cell culturesinfectedwithPRV andnon—infectedweredetectedbythestrips，respectively．Theresultsshowed thattherewasaredreactionstripatthetestlineonlywhendetectingtheinfectedcells，andtheredreac— tion strips allappeared at the controlline whatever infected．The teststrips detecting virus culture (TCID5。：10 ／o．1mI)hadadilutionl：32，whichdidnotreactwithtransmissiblegastroenteritisvirus ofswine(TGEV)andporcineepidemicdiarrheavirus(PEDV)，andtheresultsofdifferentbatchesoftest stripswerethesame．Theseresultsrevealed thattheteststrip hasgood sensitivit