反枝苋花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定.pdfVIP

4 南 昌大学学报 (医学版)2014年第 54卷第 12期 JournalofNanchangUniversity(MedicalSciences)2014，Vo1．54No．12 反枝苋花粉泛过敏原 profilin基因的克隆表达、 纯化及免疫学鉴定 谢水祥 ，龚 祥 ，龚 苗。，马 莉。，肖小军。，刘志刚。 (1．赣南医学院病原生物学教研室，江西 赣州 341000；2．南昌大学科学技术学院2011级， 南昌330029；3．深圳大学过敏反应与免疫学研究所，广东 深圳 518060) 摘 要 ：目的 克隆表达反枝苋花粉 中泛变应原肌动蛋 白抑制蛋 白(profilin)，并鉴定其免疫学活性 。方法 利用 RT—PCR结合 RACE技术克隆反枝苋花粉泛变应原profilin的全长基因，并进行序列分析。设计带有酶切位点的 特异性引物 ，采用 RT—PCR获得整个反枝苋花粉 profilin的开放 阅读框 ，将其与 pET28a载体连接并转化大肠杆菌 BI21(DE3)进行诱导表达 ，Ni。亲和层析柱纯化重组蛋 白，采用 Western—blot检测其