细菌支原体通用引物PCR+扩增研究.pdfVIP

苏州医学院学报 ； （） $’’% $% % (3 细菌、支原体通用引物!# 扩增研究 丁云芳 陈 军 （苏州大学附属儿童医院，苏州$%’’(） 摘要：以原核生物 基因（ ）为靶基因，自行设计细菌和支原体通用引物，并建立 扩增体系。其 %)*+#,- %)*+.,- !# 对细菌、支原体诊断特异性强，灵敏度达一个菌体，扩增产物经.,- 测序证实正确性佳。目的在于探讨细菌和支 原体通用的快速基因诊断技术。 关 键 词： 基因； ；细菌；支原体 %)*+#,- !# 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） #//) 01 - %’’’ 2 3/1 $’’% ’% 2 ’’(3 2 ’( ! 近年来，国内外学者相继推出细菌通用引物 后一个3$J延长至CG? 。 !# 检测新技术，为细菌性脑膜炎、胸腹膜炎和败血 菌种处理（模板制作） （）液体培养菌株： %0$ 0 / % ［ ］ 症的早期诊断提供了有效手段 % 4 ( 。鉴于支原体感 吸取培养液 /’’ E 移入 ’ 0 CE 离心管内，离心 ! 染与细菌感染的疾病谱相同，且均对大环内脂类抗 （ ） ，吸弃上清液。沉淀物用蛋白酶 %’’’+N CG? %’CG? 生素敏感。因此，我们以原核生物 %)*+#,- 基因为 溶液消化（ ，然后 ），即为 模 K J %O 1J %’CG? !# 靶基因，自行设计细菌和支原体通用引物，并建立 板液；（）固体培养菌株：用牙签挑取菌落移入内含 $ !# 扩增体系。目的在于探讨细菌和支原体通用的 生理盐水的’ 0 CE 离心管内。%’’’+N CG? 离心%’ 快速基因诊断技术，以便指导临床及时合理用药。 ，吸弃上清液。沉淀物经蛋白酶 溶液消化后即 CG? K 现报告如下。 为!# 模板液。 % 资料与方法 $ 结果 %0 % 材料 各种细菌、支原体、衣原体、病毒、真菌 $ 0 % 细菌、支原体通用引物 !# 扩增特异性试验 及寄虫等菌种来源见表 。 、 聚合酶 % 5,6!7 689.,- 将制作好的各种菌种模板液分别参与细菌、支原 及缓冲液均由美国:; 公司提供。