2013浙科版选修1第二部.分《实验六 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》word教案2.doc

辅导教案 导学诱思 一、酶与固定化酶 1．酶：活细胞产生的具有催化作用的一类有机物，它是生物体内各种化学反应的催化剂。 2．固定化酶：将________的酶用________或________方法________，使之成为________而又有________。 3．将酶改造成固定化酶的原因是： 由于酶________，且不利于________，所以要将酶改造成固定化酶。 4．酶固定化的方法有： ________法、________法、________法和________法等。本实验用的是________法。 5．固定化酶作用的机理： 将固定化酶________，当________时，在________的作用下________。 2.水溶性　物理　化学　固定在某种介质上　不溶于水　酶活性的制剂 3．在水溶液中很不稳定　工业化使用 4．吸附　共价偶联　交联　包埋　吸附 5．装柱　底物经过该柱　酶　转变为产物 二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应： 糊精　蓝　红　不显 三、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验 1．实验目的： (1)制备________。 (2)进行________的测试。 2．实验原理： 将________酶固定在________上，一定浓度的淀粉溶液经过________后，可使淀粉水解成________。用________测试，若流出物呈________色，表明有________生成。 3．本实验使用的酶及特性： 本实验使用的酶是________酶，其作用的最适宜pH为________，最适宜温度为________。 4．实验设备及用品： 5 mL塑料注射器、50 mL烧杯、滴管、自行车用气门芯及夹子、注射器架、试管或微量离心管3支。 5．实验材料及其制备： (1)材料：固定化的α-淀粉酶、可溶性淀粉酶、5 mol/L KI—I2溶液。 (2)部分材料的制备： ▲α-淀粉酶的固定化： 在烧杯中将5 mg________溶于4 mL蒸馏水中 (由于________，可能有些不溶物) 再加入5g________，不时搅拌30 min 30 min后将上述溶液装入1支注射器中 (该注射器的下端接有________并用________封住) 石英砂体积约4 mL 用________倍体积的蒸馏水________此注射器以 除去__________________，流速为1 mL/min ▲可溶性淀粉溶液：取________mg可溶性淀粉溶于100 mL________中，搅拌均匀。 ▲可溶性淀粉溶液：称取0.127 g________和0.83 g________。加蒸馏水100 mL，完全溶解后装入滴瓶中。 6．实验步骤： (1)淀粉溶液流经固定化酶柱 将灌注了________的注射器放在注射器架上，用滴管加________溶液，使该溶液以________mL/min的流速过柱。 (2)接取流出物 待从固定化酶柱中流出________mL的溶液后，接收________mL流出液。 (3)流出物鉴定 在流出物中加入________溶液，观察颜色。用水稀释________倍后再观察颜色。 (4)洗涤、保存固定化酶柱。 实验后，用________倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在________℃冰箱中保存。 (5)几天后取出冰箱中该固定化酶柱，重复实验，观察结果。 7．实验结果的比较： 1.(1)固定化α淀粉酶　(2)淀粉水解 2．α淀粉　石英砂　固定化酶柱　糊精　淀粉指示剂 红　糊精 3．枯草杆菌的α淀粉　5.5～7.5　50～75 ℃ 5．实验材料及其制备： (2)α淀粉酶　酶不纯　石英砂　气门芯　夹子　10 洗涤　未吸附的游离淀粉酶　50　热水　碘　碘化钾 6．(1)固定化酶　淀粉　0.3　(2) 5　0.5　(3)KII2 1　(4)10　4 7．蓝　红　红 核心解读HEXINJIEDU 1.酶与固定化酶一样吗？相对酶而言，固定化酶有什么优点呢？ 不完全相同，固定化酶是酶的衍生物。酶是活细胞产生的具有催化作用的一类有机物，它是生物体内各种化学反应的催化剂，而固定化酶是将水溶性的酶用物理或化学方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 固定化酶的优点： ①使酶固定化后有一定的机械强度，催化反应的过程可管道化、连续化和自动化。 ②酶不溶解在催化反应的溶液中，产物更易纯化。 ③固定化酶可反复使用，更经济，更利于工厂化生产。 ④固定化酶提高了酶的稳定性，可较长时间地贮存和使用。 固相酶是在20世纪60年代发展起来的一项技术，很快就得到了广泛的应用。 2．如何证明洗涤固定化淀粉酶柱的流出液中没有淀粉酶？ 可在试管中加入1 mL可溶性淀粉溶液，再加入几滴淀粉酶柱的流出液，混合后用手握住试管增加温