人乳头瘤病毒检测方法及其应用的研究进展.pdfVIP

第26卷第6期 广东医学院学报 v01．26 No．6 638 0FGUANGDONGMEDIo气LCOLL固GE 2008年12月 JOI瓜NAL Dec．2008 人乳头瘤病毒检测方法及其应用的研究进展 庞伟鸿，刘红杏，陈 忠 (广东省湛江中心人民医院检验中心，广东湛江524037) 提要：人乳头瘤病毒的检测对预防和筛查宫颈癌是至关重要的。检测卜珏)v的实验方法有很多且不断在完善和发 展。HPV的检测主要采用传统细胞学和分子生物学的方法。本文对}玎PrV检测方法的现状进行了综述。 关键词：人乳头瘤病毒；细胞学；分子生物学；基因型；综述文献 中图分类号：R698．2 文献标识码：A 文章编号：1005-4057(2008J06．0638．04 人乳头瘤病毒(耶V)是一种可引起人类皮肤和 要求严格。 黏膜组织良性及恶性肿瘤的病毒。它是一种双链环状 1．2免疫组化(IHC) DNA病毒，由早期基因、晚期基因(晚期基因L1和L2 分别编码主要衣壳蛋白与次要衣壳蛋白[1】)和一个不 白抗体与相对应的碰)V外壳蛋白反应来检测}伊V。 翻译的上游调节区三部分组成。迄今为止，已发现的 方法是取少量病变组织制成涂片，用特异性抗人类乳 唧V有100多个型别，各型别与体内特定感染部位和头瘤病毒的抗体进行结合反应作染色，操作简单且能 病变有关，其中40多个型别与人类生殖道疾病有关； 定位，但存在假阴性及低敏感性等缺点。分析其原因 而高危型HPV感染是子宫颈癌及癌前病变发病的必 有：(1)现有的抗体多针对病毒衣壳蛋白，当病毒整合 后，编码衣壳蛋白部分基因常有缺失；(2)卸PV整合人 要条件，99．8％的子宫颈癌患者存在高危型mV感 染【2J，因此Ⅷ)v聊蛆的检测和分型对了解相关疾的宿主细胞后，转录的mRNA结合一段宿主基因导致其 病情，特别是对女性生殖道肿瘤的癌情预报具有重要 意义。目前。对于mV的检测和基因型分型的研究进 研究结果显示，IHC的阳性检出率远低于PCR。另 展很快，实验技术不断完善，本文就船V检测进展作 一综述。 白在不同宫颈病变中的表达情况，并与已知阳性的宫 颈癌切片作为对照，当细胞核或细胞质内出现棕黄色 1细胞学检测方法 1．1细胞学检测 细胞学检测印)v感染是一种简便易行而且经济 相关的。而HPV感染在宫颈癌的发生中起重要作用， 的方法，适合大规模的普查和筛查，其方法是在患区取 几乎所有官颈癌及癌前病变中都可检测到HPV的存 材，采用巴氏染色，可见由唧V引起的“挖空细胞”。 在[7I。 虽然“挖空细胞”对诊断Ⅷ)v感染有特异性，但其敏感 2分子生物学技术 性低，假阴性率高。近年来出现了薄层液基技术和涂 片自动检测技术，可大大提高检测的特异性和敏感性， 2．1 DNA印迹杂交(sEIH) sB|H是}玎w基因分析的金标准，其方法是利用 其方法主要有TI玎法和PAPNET法。T(了r技术是 碱基互补的原理，用标记的核酸探针检测Ⅷ)V的核 通过将宫颈拭子收集的标本洗入TKnpr印PC缓冲液 中，经处理后制成薄层细胞涂片并染色；该方法被美国 酸，并对病毒DNA进行分型；这项技术曾用于册V FI)A批准用于筛查HSIL和LSIU3j。Ⅳ一NE技术是的早期研究，但此方法敏感性低、耗时，需要大量高度 在计算机辅助下对宫颈细胞学涂片进行自动化快速图 纯化的DNA，而且需要新鲜样本，故不适用于临床