平贝母总生物碱分离纯化的研究.pdfVIP

平贝母总生物碱分离纯化的研究 刘秀波，高晓波，刘宝密 (黑龙江中医药大学佳木斯攀院，黑龙江佳木斯154007) 摘要：目的：研究平贝母总生物碱提取的最佳工艺条件。方法：实验采用大孔吸附树脂富集纯化平贝母总生物碱．以平贝 母提取液中总生物碱含量为指标·采用正交实验设计将提取工艺条件进行优化。结果与结论：平贝母提取的最佳工艺条件是： A283C3。即上样pH=9．0、低浓度乙醇浓度50％和低浓度乙醇用量4BV． 关键词：平贝母；总生物碱；大孔吸附树脂 中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1008—0104(2009)01一O008一01 平贝母是我国常用的中药材．具有清热润肺．化痰止咳 与洗脱的主要因素．上样pH值、除杂用乙醇浓度和除杂用乙 之功效。主治痰热燥咳。痰多胸闷，咳痰带血等症，临床应用 醇用量按三因素三水平进行L。(3‘)正交试验设计．因素水平 广泛…。平贝母的生物活性成分主要是生物碱[2]，因此其总 见表1． 生物碱的提取在临床应用上意义重大．本实验采用正交试验 表1 大孔吸附树脂吸附洗脱因素的L，(3·)正交试验设计 设计对平贝母总生物碱的大孔吸附树脂富集纯化条件进行 了筛选．为平贝母总生物碱的工业化生产提供了实验依据． 1仪器与材料 wFZ8002D3B型紫外／可见分光光度仪(北京瑞利分析 仪器公司)。D101大孔吸附树脂(购于沧州宝恩化工有限公 ussuriensis 平贝母供试样品液，用5％NaOH溶液调节上样溶液pH后． 司)。平贝母药材为FritillariaMaxim(购自佳木斯 市药材公司)．对照品贝母素乙(购于中国药品生物制品检定 以2BV／h的流速动态吸附．再用8BV的蒸馏水以相同流速 所)． 冲洗树脂至流出液为无色。然后用适量的低浓度乙醇以 2试验方法【“妇 2BV／h的流速进行解吸附．洗脱完成后．再用95％乙醇进行 洗脱．以改良碘化铋钾试剂检测终点。收集95％乙醇洗脱液． 2．1供试样品液的徊备 减压浓缩后．于60℃条件下真空干燥至恒重，称量其质量．并 取Ikg平贝母药材颗粒，用4倍体积的50％EtOH回流提 测定其总生物碱质量．计算样品中总生物碱含量。 取3次。提取液减压回收溶剂并浓缩至流浸膏状，然后用2％ HCl研溶。并加入209硅藻土过滤。滤液用2％HCI定容至 样品中总生物碱古量(％)宣登旦嚣誓磊铲× 1000mL．得平贝母样品液。 100％ 2．2 平贝母总生物碱的含量测定 3 结果与分析 2．2．1 标准曲线的绘制 表2 大孔吸附树脂富集纯化平贝母总生物碱含量的方差分析结果 将贝母素乙配制成浓度为0．2mg／mL的对照品溶液。吸 取对照品溶液0．4mL、0．6mL、0．8mL、1．Oral、1．4mL．分别 置于25mL量瓶中，加入pH值为4．2的缓冲液5．Oral及 0．05％溴甲酚绿溶液2．OmL，氯仿定容．剧烈振摇10次．移入 60raL分液漏斗中。静置20rain，分取氯仿层置预先放有0．29从样品中总生物碱含量结果分析．最佳工艺条件是： A 无水Na：So．的100mL具塞锥形瓶中．播匀后吸取氯仿液，在 415nm处测定吸光度值。以吸光度值(A)为纵坐标．对照品醇用量4BV。在此处理组合条件下，样品总生物碱提取含量 高达53．15％。三因素对实验的影响大小为：BCA．即低 质量(X)为横坐标．求得回归方程：A=2．5013X一0．0059．，