MicroRNAs的研究方法学及其与肿瘤发生发展关系的研究进展.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 ChineseJournalofCancer Biotherapy ·397· [文章编号]1007．385X(2007)04-0397-04 ·综述 MicroRNAs的研究方法学及其与肿瘤发生发展关系的研究进展 of MieroRNAresearchanditscorrelationwith Methodology tumorigenesis：recentprogress 宋莉，王泽剑综述；殷明审阅(上海市交通大学药学院药理课题组，上海200240) [摘要] blotting分析、Real—time 发生中的作用进行研究。越来越多的研究表明，miRNAs参与了包括肝癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌、脑肿瘤及白血病在内的多种 的发生，细胞miRNA可能在致瘤病毒生命活动周期中扮演重要角色，而病毒自身为了在宿主细胞中成功存活，也必定会反过 来调节细胞miRNA的表达，参与肿瘤发生。 [关键词]MicroRNAs；肿瘤；原癌基因；肿瘤抑制基因；方法学 [中图分类号]R734 [文献标志码]A 肿瘤是目前世界上危害最严重的疾病之一。科学 1．1．1 反义抑制剂 通过人工合成反义RNA复合 家多年来努力工作，在原癌基因、抑癌基因、相关信号 转导通路研究等方面做出了不懈的努力，取得了不少 成果，但是肿瘤形成的机制仍未完全阐明。近些年一 两个独立的研究小组主要采用这种方法抑制特异性 类新的非蛋白质编码MicroRNAs(miRNAs)的出现，为miRNA，研究其在肿瘤发生中的作用归。0I。 肿瘤研究提供了新的思路。 1．1．2 点突变 这一研究方法的优点在于可以直接 MicroRNAs是一类内源性非蛋白质编码的RNA研究miRNAs与靶基因的相互作用。一些研究显示 分子，长约20～25个核苷酸…。miRNAs通过直接剪 切靶mRNAs，或者通过完全／不完全与靶mRNAs3’非 的结合是非常重要的，这种种子序列如果错配，miR． 翻译区互补结合抑制靶mRNAs的翻译。这些靶mR． NAs进一步调控多种生物学行为，如发育的进程心]、干 论，可以设计miRNAs及其靶目标的点突变。这种“种 细胞分化p。、细胞凋亡。41、疾病。、以及肿瘤发生‘61。子序列”上一二个核苷酸的改变，可以显著降低miR— 通过计算机分析显示30％以上的蛋白编码基因可能 成为miRNAs的靶基因…。研究显示，50％的miRNA 位于肿瘤相关基因组的区域或者脆弱的位点旧1，提示 肿瘤形成的话，这种点突变可以显著影响肿瘤的生物 miRNA可能在部分肿瘤发生中发挥了人们原来所不学特性。 了解的重要作用。 1．1．3其他研究方法主要有转基因、特异性引物 等‘。 本综述简要介绍miRNAs研究的方法学，以及 1．2 Northern miRNAs作为原癌基因或者肿瘤抑制因子参与人类肿 blotting分析方法 瘤发生的研究，并对人类现有miRNAs作为肿瘤治疗 Northern 的生物靶标及其潜在的应用价值作一介绍。 可靠手段，在基因表达的研究中被广泛应用。从1993 年开始，Northern 1 miRNAs研究的方法学概况 中，现在作为肿瘤细胞中miRNA表达的研究方法之 1．1 上调或者下调miRNAs的表达 [基金项目] 上调或者下调候选miRNAs的表达是研究miR—