荧光光谱法研究除草醚与牛血清白蛋白的相互作用.pdfVIP

第 25 卷第 6 期 分 析 科 学 学 报 2009 年 12 月 Vol . 25 　No . 6 J OU RN AL O F AN AL YTICAL SCIEN CE Dec . 2009 文章编号 :10066 144 (2009) 荧光光谱法研究除草醚与牛血清白蛋白的相互作用 金艳红 , 李来生 , 黄丽芳 , 陈会明 (南昌大学分析测试中心 ,江西南昌 330047) ( ) 摘 　要 :运用荧光光谱和紫外吸收光谱研究水溶液中除草醚 N P 与牛血清 白蛋 白 (B SA) 的相互作用 。结果表明 ,N P 与 B SA 形成基态复合物导致 B SA 内源荧光猝灭 , 猝灭机理主要为静态猝灭和非辐射能量转移 。运用位点模型计算 298 K 、308 K 、3 18 K 时结合常数 KA 分别为 6 . 97 ×104 、5 . 25 ×104 、4 . 96 ×104 L ·mol - 1 ,结合位点数 n 分别 为 0 . 98 、0 . 92 、0 . 96 。根据热力学参数确定其作用力以疏水作用和静电作用为主 ;运用 Fr st er 偶极偶极非辐射能量转移原理 ,测定了N P 与 B SA 的结合距离 r 为 2 . 19 nm ; 用同步荧光技术初步考察了N P 对 B SA 构象的影响 。 关键词 :荧光光谱法 ;紫外光谱法 ;除草醚 ;牛血清白蛋白;相互作用 中图分类号 :O657 . 39 　　　文献标识码 :A ( ) 除草醚 Nit hop hen ,N P 是一种选择触杀型除草剂 ,可有效防除水稻 、高粱 、玉米及大豆等作物田中一 年生阔叶及禾本科杂草 。该药可用于播前土壤处理或芽前苗后直接使用 , 选择性高 、药效好 、持效期 久[ 1 ] 。除草醚被人体吸入 、摄入或经皮肤吸收后可引起中毒 ,患者可出现高铁血红蛋白血症 、溶血性贫血 和黄疸等 。且对眼睛和皮肤有刺激作用 ,对皮肤有一定的致敏作用 。该除草剂对环境的污染越来越严重 , 已对人体健康构成威协 。牛血清白蛋白为球形蛋白,等电点是 4 . 7 ,它为一个氨基酸链 ,通过 17 个二硫键 形成 9 个双环 。研究除草醚与血清蛋白的作用 ,有助于阐明这类农药的作用机制 ,了解其对人类健康的危 害性 。有关除草醚与 B SA 的相互作用研究尚未见报道 。 ( ) ( ) 本文运用荧光光谱 F S 、紫外可见光谱 U V/ Vi s 研究了除草醚与 B SA 的相互作用 ,计算了除草醚 与B SA 结合时的作用距离 r , 表观结合常数 KA 和结合位点数 n ,从热力学参数推得农药除草醚与B SA 分 子间作用力类型等分子作用信息 ,探讨了除草醚对 B SA 构象的影响 ,试图从分子水平了解蛋白质分子与 小分子间相互作用机制 ,了解其在体内的运输和分布情况 ,为生命科学研究提供有用的信息和数据 。 1 　实验部分 1 . 1 　主要仪器与试剂 ( ) ( ) F30 10 型荧光分光光度计 日本 , 日立公司 ; U V250 1PC 型紫外可见光谱仪 日本 , 岛津公司 ; (