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荧光定量PCR检测外源基因拷贝数的新方法.pdf
第30卷第3期 暨南大学学报(自然科学版) V01．30No．3
2009年6月 JournalofJinan J蛆．2009
University(NamralScience)
应用实时荧光定量PCR检测外源基因拷贝数的新方法
万 艳， 李丽玲， 陈小佳
(暨南大学生物工程研究所，广东广州510632)
[摘要】 介绍一种采用实时荧光定量PCR法鉴定重组细胞株基因组中外源基因拷贝数的方法．首先根据研究
对象建立标准品，以拟检测的外源基因设计特定的引物，得出标准曲线，然后在不同重组细胞株中对外源基因进行
Real-Time
PCR鉴定，根据结果与标准品比对得出实际的拷贝数．结果表明：以转染8PDGFR理基因的重组CHO-KI
细胞为例，采用该方法，利用标准品制备的标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系，并且具有较大的线性
范围(101一10j拷贝)；测得各重组细胞株外源基因拷贝数不同，3次独立实验表明结果一致．与传统杂交技术鉴定
转基因拷贝数相比，该方法具有高效省时、更稳定、高通量和低成本等优点．
【关键词】外源基因；拷贝数；实时定量PCR
[中图分类号】R735．7【文献标识码】A 【文章编号】 1000—9965(2009)03—0310—04
Anewmethodto the of
tetermine numbers
copy exogenous
absolute Real-TimePCR
gene assay
by quantitative
WAN CHEN
Yan，LILi—ling， Xiao-jia
Institute
ofJim 510632，China)
(Bioengineering University，Guangzhou
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[Abstract]To
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