HPLC法测定甘草中总黄酮含量.pdfVIP

第十届会困有机分析学术研讨会 HPLC法测定甘草中总黄酮盒量 张爱华文红梅 彭国平 上官方 (南京中医筠大学． 南京210029) 关麓词甘草甘草总黄酮HPLC 撮薹本文以甘草素、异甘草索为对照品，采用酸水解样品、HPLC色谱法测定甘草中总黄酮 Uralensis 含量，并分别分析了内蒙、新疆、甘肃三产地甘草(GlycyrrhizaFish．)．测定结果表 明其中以内蒙甘草的甘草总黄酮含量最高，蜜炙法炮制使甘草总黄酮含量有所提高。 甘草具有补脾益气、清热解毒、缓急止痛、调和诸药的作用，甘草的主要成分为甘草酸 类及黄酮类化合物，目前甘草总黄酮的含量测定未见报道。近年来，我们对甘草抗心律失常、 解附子毒性的活性成分做了研究“’2’，发现甘草总黄酮及甘草异黄酮成分具有明显的抗鸟头碱 诱发心律失常的作用。本文以甘草素、异甘草素为对照品，采用酸水解样品、HPLC色谱法 uralensis 测定甘草中总黄酮含量，并分别分析了内蒙、新疆、甘肃三产地甘草(Glycyrrhiza Fish．)。结果表明：各产地的甘草中总黄酮含量有明显差异，以内蒙产的甘草质量较佳，蜜 炙炮制使药材的甘草总黄酮含量有所提高．与炙甘草汤主治脉结代、心动悸的临床作用相符 合。 1仪器药品 甘草素、异甘草素，由南京中医药大学彭国平提取分离纯化，并经Uv、IR、MS、NMR uralensis 等结构鉴定，HPLC检测为单一成分。甘草(G1ycyrrhizaFish)：产予内蒙、新 疆、甘肃。由南京中医药大学吴启南副教授鉴定药材及品种。炙甘草：以上药材按中国药典 九五版炙甘草项下炮制方法炮制，得率123．3％。 2方法与结果 2．1色谱条件 度为O．02 ml／min。 AUFs，柱温25℃，纸速为1．5ram／rain，流速为1．0 2．2标准曲线 峰面积平均值为纵坐标， 进样量为横坐标制定标准曲线，结果如下：甘草素回归方程A= 2．3样品翻备 B127 第f届令闺钼{J【}析：、#术研I、『会 置80℃水浴上同流40分钟，取出，加适量NaOH液及少J戢--L冰ttAc pH‘≯．弱酸性，加甲醇定：雒． 至50ml，经0．45p．m微孔滤膜过滤，得H‘草样，铺液。 2．4样品测定 准确吸取甘草样品液20ul，按上述色谱条件测定，外标两点法计算，，{：折合成生品的 百分含量。结果为：内蒙产生品2．25％，蜜炙赫2．67％；新疆产：上品1．56％，蜜炙品1．j’1 ％：甘肃产生r晶1．2l％，蜜炙s锆1．35％。 。 2．5加样回收率测定 即总黄酮鲑j白 取生甘草粉末约30mg，加对照品甘草素0．238mg，异甘草素0．127rag， 0．365mg，按样品制备项卜．操作，得平均同收率为101．8％．．RSD=O．7％。 3讨论 甘草中黄酮成分很复杂，但其：主：要成分是甘草素、异甘草素及其它们的甙类衍生物。本 方法先以酸水解，将甙类成分水解成甘草素、异甘草素，再以HPLC测定，方法简便、可靠。 甘草素(甙)属二氢黄酮类，与异黄酮类的异甘草素(甙)在酸、碱条件F会发生结构互变， 属互变异构体。我们研究发现，在强碱条件下甘草素(甙)可完全转变为异甘草素(甙)， 在弱碱或强酸作用下，它们可互相转化。对它们分别进行同收率测定时不稳定，以这对互型乏 异构体的两个对照品总量来进行计算，同收率在95