大肠杆菌caiDE的基因克隆与表达.pdfVIP

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2017-08-11 发布于重庆
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大肠杆菌caiDE的基因克隆与表达.pdf

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卷期微生物学报 ! # ’()! 0’)# 年月 $ %$ !#$%’()(*($,-$ *+,+-.+/ $ + !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 大肠杆菌$!的基因克隆与表达蒋建雄段世伟张惠展（华东理工大学国家生物反应器重点实验室上海） $$72 摘要：从菌体的染色体中利用鸟枪法克隆含编码肉碱消旋酶及相关 !#$%89!% *0: 因子的#’*;基因片段，并经序列分析验证。由重组质粒亚克隆得到重组 =717 *?@$ 表达质粒，后者转入（）菌株中，经异丙基硫代半乳糖苷（）诱导，在聚丙 !#$%AB$%*;7 CDEF 烯酰胺凝胶电泳（）上分子量为和附近可见明显的表达蛋白带。 ?*?5D:F; 7G* $!G* 关键词：，基因表达，，（） #’*; !#$%89!%!#$%AB$%*;7 中图分类号：文献标识码：文章编号：（） H126 : %5#$1 $ #536#51 ［，］肉碱（）又称为维生素 %$ ，分为型和型，后者具有促进脂肪酸代谢、 ,I/JKLKJ+ AL * B 解除氨的毒性、消除自由基、抗氧化等功能，肉碱完全无活性且还可能抑制肉碱的利 *5 B5 用，因此美国在年就禁止出售混旋型肉碱。 M*: %167 *B5 肉碱一般采用化学合成法来生产，但拆分其中具有生理活性功能的型旋光体 *B5 B 一直是限制肉碱大规模生产的重要因素。自然界中只存在肉碱，故通过对生物体内 B5 B5 肉碱分解合成途径的深入研究，人们了解到在一些肠道细菌如大肠杆菌、变形杆菌和沙 B5 ［］门氏菌中，肉碱代谢与操纵子#’E:A9*;密切相关7!3 。特别是#’*编码的肉碱消旋酶能简洁地将肉碱转化为肉碱，从而为肉碱的生产提供了新思路。另外编