李斯特菌噬菌体的分离鉴定和其裂解特性研究.pdfVIP

704蟋》2010年学术年会 T060018 李斯特茵噬菌体的分离鉴定及其裂解特性研究 张辉包红朵王冉 (江苏省农业科学院农业部食品安全监控重点开放实验室， 江苏省畜禽产品安全性研究重点实验室，江苏南京210014) 引言／目的 李斯特菌(Listeria)是一类能够引起动物和人李斯特菌病的革兰氏阳性细菌，其中单核细胞增生 性李斯特菌(L 在低温环境中仍可生长繁殖(如2～8℃)，是冷藏食品以及即食食品及加工环境中威胁人类健康的重要 病原菌。用噬菌体控制食源性致病菌的研究已有报，获得广谱李斯特菌噬菌体解决了噬菌体单一、特异 的问题，同时其高效裂解活性以及天然无污染的特性是传统的化学杀菌剂无以比拟的。本研究旨在鉴定 分离的毒性李斯特菌噬菌体，同时分析其生物学特性及裂解特性，并在牛奶及肉制品中进行了初步应用， 这为食源性病原生物防控提供了新途径。 材料和方法 用双层平板法从污水样中分离Lm噬菌体，PEG／NaCl法沉淀纯化噬菌体，负染色后电镜观察。分析 噬菌体对宿主菌的裂解特性及其对温度和pH的敏感性，同时对该噬菌体进行宿主谱系分析。将噬菌体 运用于即食性食品中，分析其潜在的灭菌效果。 结果 分离所获得的／an噬菌体为裂解性噬菌体，属长尾噬菌体科，命名为LipG2．5。体外能够高效裂解Lm 宿主菌，对温度及pH亦有良好的耐受性。基因组酶切分析表明，LipG2．5为双链DNA噬菌体。噬菌体谱 系分析表明，该噬菌体为一株宽宿谱噬菌体，能够裂解Lm、威尔氏李斯特菌及英诺克李斯特菌。在食 品灭菌试验中，噬菌体LipG2．5能够在固态及液态即食性食品中高效杀灭Lm，为食品中及食品加工环境 中食源性病原菌的生物防控提供了新途径。 讨论 噬菌体控制食源性病原污染已有报道，但用广谱性噬菌体用来控制李斯特菌的报道鲜少。有文献报 道，噬菌体在人体用于治疗的临床病例己累计达数千例，2005年，Bmttin等首次报道了大肠杆菌噬菌体口 服治疗腹泻性疾病的安全性报道，结果表明噬菌体口服后并不影响人体的转氨酶水平，同时并没有检测 到噬菌体抗体，其安全性获得认可。2006年，美国FDA己批准噬菌体作为食品添加剂用于杀灭食品中的 用是安全可行的。噬菌体具有天然杀菌特性，但特异性较强，而我们所分离的Lm噬菌体LipG2—5不仅能够 裂解Lm，还对威尔氏李斯特菌、英诺克李斯特菌以及绵羊李斯特菌均具有良好的裂解活性，是一株较为 广谱的李斯特菌噬菌体。在食品中人工污染试验中，噬菌体能够高效杀灭李斯特菌，这将为食品以及医 学行业提供重要生物防控制剂源及治疗途径，目前在国内李斯特菌生物防控中的报道尚属首例。 参考文献(略)