p27^kip1及其出核相关分子激活蛋白1辅因子在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系.pdfVIP

维普资讯 生堡 遮堂盘圭 !年12旦筮28卷第 l2期 ChinJHematol，December2007，Vo1．28，N0．12 · 8l3 · · 论 著 · p27p及其出核相关分子激活蛋 白1辅因子 在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系 王熵婵 赵明铭 沈爱国 陆建新 张冬梅 何松 程纯 【摘要】 目的 探讨p27 及其出核相关分子激活蛋白1(AP一1)的辅助因子Jabl在淋巴瘤细胞 中的表达变化及相互关系。方法 采用血清饥饿合并释放方法同步化处理淋 巴瘤细胞系Jurkat和 Raji细胞，分别采用Westernblot及 RT—PCR技术检测p27“、Jabl在淋巴瘤细胞中的蛋白表达水平和 mRNA表达水平变化 ；采用来普霉素 B(LMB)刺激增殖过程中的淋巴瘤细胞 ，检测 p27“、Jabl的表达 变化；构建人Jabl基因的pcDNA3．1一myc-Jabl的真核表达质粒 ，脂质体转染Jurkat细胞 ，配合免疫荧光 技术检测p27“的亚细胞定位情况；免疫沉淀检测Jurkat和Raji细胞中p27“与Jabl的结合情况。结 果 血清饥饿导致Jurkat和Raji细胞生长周期停滞，p27“蛋白总量增加，Jabl蛋 白总量减少。血清 释放后两者的蛋 白水平呈现相反的表达变化，而p27“p】mRNA水平无明显改变。LMB可以抑制 由血 清释放引起的细胞增殖，在此过程中p27“表达上调，Jabl表达下调。转染Jabl真核表达质粒的Jur— kat细胞 p27“定位有明显的改变。免疫沉淀结果显示在Jurkat和 Raji细胞中p27“与Jabl相互结 合。结论 Jabl可能通过与p27“结合来介导p27“的核内外分布并影响其表达，进而影响 p27 的 功能状态，从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。 【关键词】 细胞系，Jurkat；细胞系，Raji； p27“蛋白；激活蛋白1辅因子 Expressionandrelationshipofp27 andit’snuclearexportfactorJablinLymphomacellJurkat WANGYu—chan ，zHAO Yue—ming，sHEN Ai—guo，LUJian—xin，ZHANGDong-mei，HE Song，CHENG Chun． DepartmentofMicrobiologyandImmunology，NantongUniversity，Nantong 226001，China Correspond ingauthor：cHENG Ch1An．Emaitcheng chun@yahoo．con．cn _ A【bstract】 0bjective Toinvestigatetheexpressionandrelationshipofp27“anditsnuclearexport factorJab1duringproliferationprocessoflymphomacel1．Methods JurkatandRajicellsweretreatedwith serumstarvationnadthenserum release．TheproteinnadmRNAexpressionof027“、Jablinthecellswere detectedbyWesternblotandRT．PCR respectively．LMBwereusedforstimulatingJurkatcellsduringtIleir proliferationprocess．andthentheexpressionchnagesofp27 nadJablweredetected．Aneukaryoticex— pressionplasmid(pcDNA3．1-myc)containingJablwascontr