PIB基因点突变与淋病奈瑟菌对青霉素和四环素耐药相关性的研究.pdfVIP

维普资讯 中国卫生检验杂志2007年 12月第 17卷 第12期 ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology，Dec2007；Vol17 No12 2159 【论著】 PIB基因点突变与淋病奈瑟菌对青霉素和四环素耐药相关性的研究 孙爱华 (浙江医学高等专科学校，杭州 310053) [摘要] 目的：了解浙江地区分离的淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素的耐药率及该菌PIB基因G120和A121点 突变与青霉素和四环素耐药性的关系。方法：采用高保真 PCR扩增25株淋病奈瑟菌PIB基因序列，T—A克隆后测序。 分析测序菌株PIB基因中与耐药性密切相关的G120和A121变异情况，采用二倍琼脂稀释法确定PIB菌株的耐药性。 结果：25株淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素均耐药，耐药率为 100％。经测序的25株 PIB淋病奈瑟菌中，1株 (4．O％)G120或A121均未突变，其对青霉素和四环素的MIC分别为8 g／ml和4 g／ml。5株 (20．O％)G120D／N突变 而A121不变，1株 (4．0％)G120不变而A121G突变，2株 (8．0％)G120N突变但 A121缺失，l6株 (64．0％)G120K和 A121D双位点突变。24株G120和／或A121突变的PIB菌株均对青霉素和四环素的MIC为 4～128 g／ml不等。结论： 浙江地区分离的PIB型淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药率为 100％。上述淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药与 PIB基因氨基酸序列 G120和／或A121突变密切相关。 [关键词] 淋病奈瑟茵；青霉素／四环素；耐药性；PIB基因；点突变 [中图分类号] R759．2 [文献标识码] A [文章编号] 1004—8685(2007)12—2159—03 CorrelationbetweenpenicillinandtetracyclineresistanceofNeisseriagonorrhoeaeisolates andsitemuattionofPorin 113gene SunAi—hua (ZhejiangMedicalCollege，Hangzhou310053，China) [Abstract] Objective：TounderstandpenicillinandtetracyclineresistanceofNeisseriagonorrhoeaeisolatesfromZhejiangand todeterminethecorrelationbetweentheresistancenadsitemutationG120or／andA121ofthebacterial PIBgene．Methods：The PIBgenesof25N．gonorrhoeaeisolateswereamplifiedusinghishfidelityPCR．Thetargetamplificationfragmentswere sequenced afterT—A cloning．Th emutationsitesG120nadA121thatiscloselyrelatedtodrugresistanceofthesequencedPIB strainswere analyzed．Andthedurgresistnaceofthesestrainswa$detemr inedusingdoublingagardilutionmethod．Results：Allthe25isolates wereresistanttopenicillinandtetracycline．Accordingtotheseuqencingresults，1s