应用均匀设计法优化黄檗中有效成分超声提取工艺.pdfVIP

应用均匀设计法优化黄檗中有效成分超声提取 工艺书 张玉红 东北林业大学林业生物制剂教育部工程研究中心，哈尔滨，150040 东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室，哈尔滨，150040 摘 要：利用均匀设计法优化了超声辅助提取黄檗树皮中三种主要有效成分的j1_：艺。考察了 乙醇浓度、提取温度、提取时间对三种有效成分提取率的影响，并用高效液相色谱法测定了提取物中 三种有效成分的含量。试验结果表明，用63％的乙醇作溶剂，在4l℃条件下超声提取黄檗皮64min 为最佳提取条件，且提取率高、选择性好，故具有一定的应用前景。 关键词：黄檗：均匀设计：有效成分：超声提取 aNufense 黄檗(PhellodendronRupr．)为芸香科的阔叶乔木，是东北阔叶红松林的重要伴生 树种，也是东北著名的三人硬阔之一，为珍贵的用材树种，是我国二级保护植物。黄檗也是我国名 贵中药黄柏的约源植物，其内皮(韧皮部)入药，称为关黄柏。黄檗中生物碱含量丰富，已从黄檗 中分离、鉴定出的多种生物碱¨’引，但其主要生物碱和药用成分是小檗碱、药根碱、掌叶防己碱。众 所周知，小檗碱具有较好的抗菌作刚，而学叶防己碱可作为镇痛药四氢巴马亭和抗凿约盐酸巴马：亭 的原料，药根碱本身具有类似‘T-,J,檗碱的抗菌活性|3’。目前黄檗提取主要采刚有机溶剂提取法。传 统提取方法操作时间长、提取效率低。超声提取是超声波和传统的溶剂提取法相结合后形成的一种 新型提取技术，超声波能产生并传递强大的能鼙，在植物组织细胞里比电磁波穿透更深，停留时间也 更长，使液体被击成很多的小空穴，并进而产生空化作用，使植物细胞破裂¨’。。与传统提取方法相 比，超声提取具有提取时间短、产率高、质量稳定、操作简单等优点。在天然产物提取领域表现山 良好的应刚前景m1。本研究以乙醇为溶剂，利用超声辅助提取黄檗树皮中三种主要有效成分的工艺， 并采用均匀设计方法，以三种生物碱的提取率为考察指标，优化了其超声辅助提取工艺。 1材料与方法 1．1材料与仪器 原料：黄檗树皮采自哈尔滨市东北林业大学实验林场。将干燥的黄檗树皮粉碎后过60目筛，备 用。 仪器：KQ_IOODB超声波仪，江苏昆山超声仪器公司。 Waters高效液相色谱仪，2487型紫外检测器； ABl04型电子天平，瑞士； Si gma3K30高速冷冻离心机，Sigma公司 试剂：乙腈为色谱纯：水为超纯水；其它试剂均为分析纯；小檗碱和药根碱标准品购于中国药 品生物制品检定所，掌叶防己碱标准品购于美国Adrich公司。 1．2方法 1．2．1三种生物碱的提取 影响植物中有效成分提取的因素很多，主要有提取溶剂、样品粒度、提取温度、提取时间、溶剂 用量、提取方法等¨‘。本研究选择了乙醇浓度、提取温度和提取时间进行3因素10水平的均匀设计 实验(见表1)，以生物碱的提取率为评价指标，探讨了超声波提取黄檗中三种生物碱的最佳条件。 mL容量瓶中，按照设计的实验条件，分别加入不同浓度的乙醇 精密称取0．19黄檗树皮粉于10 9mL(每个试验重复3次)，在相应的温度下超声波提取相应的时间，而后冷却至室温，再用相应的 乙醇定容至刻度，备用。 1．2．2标准品的测定 sil mm，5p 1．2．2．1色谱条件色谱柱日本KYAHIQ C18柱(250唧X4．6m)；柱温 ’黑龙江省青年科学技术专项资金资助(QC05C67) 153 llL。 流速1．OmL／min；检测波长345nm；进样量10 1．2．2．2标准溶液的配制精密称取小檗碱标准品5．0mg、掌叶防己碱标准品4．8mg、药 根碱标准品1．3 mg，用上述流动相溶液分别定容至lOmL。分别吸取上述标准品溶液5．0mL，合并、 摇匀，作为母液。 1．2．2．3标准曲