人端粒酶逆转录酶转染人胎肝细胞生物学特性.pdfVIP

7 ·论著· 人端粒酶逆转录酶转染人胎肝细胞生物学特性 周小民 宋向晖 肖晓琴 陆路 广州市第十二人民医院肝胆外科(510620) 【摘要】 目的探讨端粒酶逆转录酶基因转染人胎肝细胞以获得永生化肝细胞的可行性。方法 四步灌 流法分离人胎肝细胞。携端粒酶逆转录酶基因载体转染人胎肝细胞，光学显微镜观察转染细胞形态变化及增殖 能力。免疫组织化学和流式细胞技术检测转染细胞白蛋白表达情况，同时鉴定转染细胞是否具有糖原合成、尿素 氮合成等肝细胞功能。结果端粒酶逆转录酶基因转染人胎肝细胞可以重建人胎肝细胞的端粒活性。转染细 胞培养5d时呈集落样生长。12d时增殖融合成片状，且具有表达肝脏特异性蛋白、白蛋白和具备糖原合成、尿 素氮合成等肝细胞功能。结论采用端粒酶逆转录酶基因转染人胎肝细胞技术有望获得永生化肝细胞，这可 能为细胞移植和生物人工肝治疗各种难