W-15菌株产生的纤溶酶蛋白的提取与纯化.pdfVIP

维普资讯 第30卷第 1期 河 北 农 业 大 学 学 报 VO1．30NO．1 2007年 1月 JOURNALOFAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI Jan．2007 文章编号 ：1000—1573(2007)O1 0065—03 W 一15菌株产生的纤溶酶蛋 白的提取与纯化 王 峰 ， 李术娜 ， 朱宝成 ， 武翠红 ， 袁洪水 (1．河北大学 生命科学学院，河北 保定 071002；2．河北农业大学 生命科学学院，河北 保定 071001) 摘要 ：为从微生物 中获取溶栓药物 ，从土壤 、豆豉 中获得产纤溶酶活性高的 1株菌株 ，命名为 W 一15。经检测 ， 发酵上清液 中纤溶活性的蛋 白酶分子质量约为 36kDa，酶的比活为 1571UK／mg。 关 键 词 ：纤溶酶 ；菌株 ；筛选 ；纯化 中图分类号 ：Q 814．1 文献标识码 ：A Isolation and purification offibrinolytic enzymefrom W 一15strain W ANG Feng ，LIShu—na。 ZHU Bao—cheng ，。 W U Cuihong。 YUAN Hong—shui。 ， ， ， (1．CollegeofLifeScience，HebeiUniversity，Baoding071002，China； 2．CollegeofLifeScience，AgriculturalUniversityofHehei，Baoding071001，China) Abstract：Inordertogainthrombolyticdrugfrom microorganism ，astrainnamedW 一15withhigh yieldoffibrinolyticenzymewasseparatedfrom thesoilandthefermentedsoybean．Itwasproved thatapotentfibrinolyticenzymepurifiedfrom thecell—freesupernatantwasestimatedtobe36kDa anditsspectificactivitywas1571UK／mg， Keywords：fibrinolyticenzyme；strain；screening；purification 血管堵塞所引起 的心肌梗塞和脑梗塞 ，是当前 品中分离到 1株高产纤溶酶的菌株 ，并从发酵液 中 临床死亡的主要原因之一。其病因是纤维蛋白聚集 分离纯化出纤溶酶 ，旨在为从微生物 中获取溶栓药 于动脉管壁所导致 。因此 ，研制和发展高效 、特异、 物提供技术支持。 安全 、副作用小 的溶血栓药物 ，一直是近年来全世界 1 材料与方法 范围的热门课题 。自1987年，由日本的须见洋行… 等首先发现纳豆中存在纳豆激酶以来 ，又从动物 中 1．1 材料 分离到蚯蚓纤溶酶 ，植物 中分离到蒲黄纤溶酶 屠宰场的土壤 ，各产地的豆豉 、豆瓣酱。 等一些具有纤溶活性的蛋白酶。 1．2 培养基 微生物是获得溶栓药物的一个重要来源。如从 富集培养基 ：猪血粉 2％，蛋 白胨 1％，NaC1 枯草芽孢杆菌 (Bacillusubtilis)获得了纳豆激酶 ， 0．5％ ，pH 7．2： 链球菌 (Streptococcus)中获得