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萃取剂对浸矿微生物种群的影响研究 陈勃伟李文娟刘兴宇周桂英温建康 (北京有色金属研究总院生物冶金国家工程实验室，北京100088) 摘要研究了不同萃取剂浓度对浸矿微生物生长和氧化活性的影响。并利用16SrDNA克隆文 库技术研究了微生物种群的变化规律，结果表明：添加0．5％的萃取剂后，溶液中的细菌数量有 所减少，At．ferrooxidans和A．organovorum所占比例增加，而Lferriphilum所占比例减少。当萃取 荆浓度提高到1％时，微生物的生长都被抑制。克隆文库分析表明，培养液中的优势种群主要为 At．ferrooxidans、A．organovorum和Lferriphilum，对萃取剂的敏感度大小排序为：Lferriphilum At．ferrooxidansA．organovorum。 关键词 萃取剂 浸矿微生物微生物种群克隆文库 生物冶金技术由于其所具有的优点：环境污 本文研究了不同萃取剂浓度对浸矿微生物生 染小、工艺简单、装备简单、投资小、成本低、 长和氧化活性的影响，并利用16SrDNA克隆文库 污染轻、资源消耗量小以及能够处理低品位矿等 技术研究了微生物种群的变化规律，以便能找到 诸多优点…，而且也适合社会可持续发展的需求， 优化浸矿过程的方法。 因此已成为金属提取的新领域。该技术可以回收 1材料与方法 的金属包括铜、镍、钴、锌、铀等。其中以硫化 铜矿的生物堆浸应用最多，目前已经在多个国家 1．1 不同浓度萃取剂对浸矿微生物生长的影响 建立了生物堆浸提铜厂，如智利、澳大利亚、美 实验所用细菌是从紫金山铜矿生物堆浸矿堆 国、秘鲁、中国、缅甸、塞浦路斯等，采用该技 中分离筛选出来的混合菌。在300mL锥形瓶中加 术生产的铜占世界铜生产总量的25％B叫J。 工业生物堆浸一萃取一电积是一个循环封闭 入0．5％和1．0％的萃取剂ZJ988，同时做对照实 过程，在萃取过程中萃取剂通过溶解、夹带等途径 验。用稀硫酸调pH为1．8，分别在33℃的摇床上 流失于萃余液，而萃余液会返回堆场进行喷淋， 培养，摇床转速160r／min，每隔24h测定培养液中 因此在这个循环过程中，微生物就不可避免的会 的细菌浓度、pH和电位。每组做2个平行样。9K 与萃取剂进行接触。萃取剂中的苯酚、壬基酚对 浸矿微生物有毒害作用，影响浸矿效率。邱冠周 o．19KQ，o．59l(2nP04，0．59 等的研究表明，不仅萃取剂会抑制细菌的生长， FeS04·7H20。 Ca(N03)2，她229 稀释剂煤油也有此影响。不同组成的有机相抑制 1．2培养液总DNA的提取与纯化 实验结束后将各浓度萃取剂的最终培养液和 能力由强到弱为260号工业煤油+1．5％Li，984N 260号工业煤油循环有机相正辛烷1．5％ Li。984N正辛烷∞J。Wading等研究了不同浓度萃 DNA ferrooxidans、Sulfobaeillus溶解DNA。粗提的DNA采用WizardClean—Up 取剂对Acidithiobaeillus thermosulfidooxidans和Acidiphiliumeryptum生长和System 1．3 168 活性的影响，结果表明，50mg／L的萃取剂浓度就使 rDNA片段的扩增和克隆文库的构建 S．thermosulfidooxidans的活性