【创新设计】2014-2015学年高二生物人教版选修1课件：2-1 微生物的实验室培养.pptVIP

②接种操作成功的标准 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合该菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中无菌操作还未达到要求，实验失败，需要分析原因，再次制备。 特别提醒　(1)进行划线时最后一区和第一区不可接触。 (2)平板划线各次灼烧接种环的目的。 平板划线操作第一次划线及每次划线之前都需灼烧灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环，每次灼烧目的不同。 (3)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 第一次灼烧 每次划线之前灼烧 划线结束 目的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 灼烧杀死上次划线结束后接种环上残留的菌 种，使每 次划线的菌种来自上次划线末端 划线结束后杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 【巩固2】 下列有关平板划线操作的叙述不正确的是 (　　)。 A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种 C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 解析　平板划线操作中，接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种。划线结束仍需灼烧接种环，是为了能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。 答案　C 【例1】 氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。 微生物的营养与培养基类型 图1 表1　培养基的组成 (1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的______。 (2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是______。 (3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于______培养基和______培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是______。 (4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为______。 (5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在______培养条件下最早停止生长，其原因是_________________________________。 图2 思维导图： 深度剖析　本题考查培养基的配制原则以及微生物的实验室培养过程，意在考查考生的图表信息转换与分析能力。(1)固体培养基中需加入琼脂作为凝固剂。(2)先配制培养基后灭菌，调pH属于培养基的配制过程，故先调pH后灭菌。(3)从用途上看，Ⅰ号培养基为通用培养基(基本培养基)；Ⅱ号培养基是选择培养基，以氯苯为唯一的碳源，其中为SP1菌提供氮源的成分是硝酸铵。(4)芽孢是在细胞质内高度浓缩脱水形成的抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。(5)由图示可知SP1菌在20 mg/L氯苯培养条件下最早停止生长，20 mg/L氯苯可提供的碳源较少，碳源最早耗尽，影响菌体的生长繁殖。 答案　(1)琼脂　(2)先调pH，后灭菌　(3)通用　选择　硝酸铵　(4)芽孢　(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗尽 [误区警示](1)琼脂是最常用的凝固剂，但固体培养基未必均加琼脂，如棉子壳培养基也属固体培养基。 (2)牛肉膏、蛋白胨等天然物质既可提供碳源，也可提供氮源及生长因子。 【例2】 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是 (　　)。 ①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线灭菌　⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ 无菌操作技术 思维导图： 深度剖析　培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。 答案　A [思维深化]几种常用灭菌方法比较(见下表) 方法 灭菌操作 适用对象 灼烧 灭菌 在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 对接种环、接种针或其他金属工具灭菌，也可以对试管口、瓶口灭菌 干热 灭菌 在干热灭菌箱内，160～170 ℃条件下，加热1～2 h 耐高温且需保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属用具等 高压 蒸汽 灭菌 在高压蒸汽灭菌锅内，121 ℃，100 kPa，灭菌15～30