猪无名高热临床病例的研究.pdfVIP

第三届猪病防控学术研讨会会议论文集 猪无名高热临床病例研究· 李金栋1-2张茂林¨周玉1·2杜运生3卢士英1-2任洪林1．2柳增善1·2 (I．吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春130062；2．吉林大学人兽共患病研完所，吉林长春1300623．长春市 康发动物药品研究所) 摘要通过对吉林省、辽宁省部分地区流行病学调查，获得猪“无名高热”发病情况资料。电镜直接观察所收集到 的病料，主要为猪繁殖与呼吸综合症病毒、副粘病毒、猪瘟病毒形态；将吉林省的无名高热病病料中分离到的副粘 病毒、病料原液以及由病料制得的自家灭活疫苗接种到血清检测无名高热主要病原抗体阴性的健康猪仔，同时设立 阴性对照，对临床感染的仔猪进行了病理变化．病毒分离，细菌检测等方面的鉴定分析，对无名高热病病原的致病 特点，发病规律和灭活疫苗使用中出现的抗体依赖性增强作用(ADE)现象进行了探讨研究。结果表明：初步认定 两省部分地区无名高热的主要病原体为PRRSV。由病料所制得灭活疫苗在活体中具有抗体依赖性增强作用(ADE) 现象． 关键词猪无名高热、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪副粘病毒，灭活疫苗．抗体依赖性增强作用 自2006年6月至2007年，我们先后在吉林省和辽宁省部分地区的猪场发现有发病急，以呼吸急促、 全身皮肤发绀、高烧持续不退、病程短、死亡率高等为主要临床症状的猪病疫情，初步疑似“无名 高热病”，该病给猪场及养殖户造成了严重的经济损失。通过对病料直接电镜观察，主要见到以猪繁 殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(HCV)、副粘病毒(Swine 乎每个病例都是如此。个别见到猪圆环病毒(PCV．II)，脏器纯培养发现34种细菌，致病性病原菌 主要为多杀性巴氏杆菌(PM)。用病料原液、分离得到的副粘病毒做了猪的试验，副粘病毒小鼠试 验，用制得的自家灭活苗对5个猪场进行保护性试验，防护效果很好。 I材料 三个具有代表性的长春某猪场的病料，采自长春市某猪场。PCR仪，离心机，购自Biometra公哥。 饲养场。 ． 计扩增片段大dx蔓J499bpRNA提取试剂盒，购自BioFlux公司。 2方法 2．1流行病学调查 长春市的5个猪场、四平市的3个猪场、吉林市1个猪场，辽宁省2个地区的3个猪场。进行了发病 情况调查。了解发病、流行、治疗和死亡情况，采取病料，进一步诊断。 2．2病原检测 取病死猪的肺、脾脏、淋巴结等组织。剪碎后放于灭菌的研磨器中加PBS缓冲液磨碎，离心取 抽提得到的RNA3I-tL放入无RNA酶的灭菌EP管中，】Jl／X．IpL 2pL， AMV Inhibitorl lpL，Rnase 然后是分别做PRRSV、猪瘟病毒和猪副粘病毒的PCR鉴定，其中它们的退火温度分别为57℃、 59℃、62℃。取上述反转录产物lgL于1．5mL反应管中，力1A181aL灭菌四馏水，2．5I．tLPCR缓冲液， 吉林省重点项目资助 作者简介：李金株(1984-05·)，男，在读硕士，山东省聊城人，食品安全；食品安全与人兽共患病， E-mail：beifenggo@163．corn 通信作者：柳增善，博导，教授，E-mail：zsliul959@sohu．coril 盔 05pLdNTP，PI、P2(50Pmo札L)各059L．0 最后通过电泳结果鉴定。 2．3试验猎分组 选用以RT-PCP,域传基因鉴定方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒，猪副粘病毒血清抗 体阴性的健康仔猪5头，随即分为三组．攻霉组第l、2组，2头，组，第3组l头作为对照。将各组猪分 别同条件饲养在三个隔离舍中。 2．4试验猪攻毒 在饲养10大后用产生细胞病变的第四代分离得到的副粘病毒藏分别以滴鼻和灌服的方法接毒第 1、2组试验猪．2mL／头：对J{l【组滴鼻接种无副粘病毒的细胞培养物，28天后接种由病科制得的灭活 疫苗．接种试验猪3mL／头。50天后接种由痛料制得的强毒．3mL／头．分别滴鼻和灌服接毒1、2实验 纽。75天后对最后一头剩余的试验猪进行肌肉注射接强毒。 2．s症状观寨 每天观察记录各组猪的采食