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利用晚疫病菌无毒基因瞬时表达技术鉴定马铃薯抗病基因——周 晶，张子莹，路 远 ，等 ·217· 中图分类号：$532 文献标识码：A 文章编号：1672--3635(2014)04—0217—08 利用晚疫病菌无毒基因瞬时表达技术 鉴定马铃薯抗病基因 周 晶，张子莹，路 远，田振东 ，谢从华 (园艺植物生物学教育部重点实验窒。国家蔬菜改良中心华中分中心，华中农业大学。湖北 武汉 430070) 摘 要：由Phytophthorainfestans引起的晚疫病是马铃薯的毁灭性病害。明确现有马铃薯品种或育种材料含有 的晚疫病抗病基因，对于抗病育种和合理利用不同抗病基因防治马铃薯晚疫病具有重要意义。根据 “基因对基因”学 说，马铃薯无毒基因与抗病基因产物互作会产生典型过敏反应(HR)。理论上利用病原茵无毒基因可以鉴定马铃薯是 否含有相应抗病基因。本研究尝试利用农杆菌注射技术，在马铃薯叶片中瞬时表达晚疫病菌无毒基因(Avr)，根据过 敏反应发生情况，进而推断马铃著品种／育种材料所含相应抗病基因()。研究结果显示：适合马铃薯瞬时表达的农 杆菌浓度为0．5(OD~)，马铃著材料农杆茵瞬时表达存在明显的基因型和叶龄依赖性，充分展开的幼嫩叶片适合农杆 菌瞬时表达。ArJ，Ar2，A 。和A 在合有相应抗病基因的马铃薯鉴别寄主上瞬时表达能够产生HR，表明无毒基 因注射鉴定结果是可靠的。无毒基因注射鉴定结果与抗病基因特异引物PCR扩增结果在不同基因型材料上有时并不 一 致，反映了这两种方法各有局限洼，若能将这两种方法结合使用，则会提高鉴定结果的准确性。 关键词：马铃薯；晚疫病；无毒基因；抗病基因；瞬时表达；农杆菌注射 IdentificationofLateBlightResistanceRGenesofPotatobyTransient ExpressingofPhytophthorainfestansAvirulenceGenes UsingAgro．infiltration ZHOUJing，ZHANGZiying，LUYuan，TIANZhendong ，XlEConghua (KeyLaboratoryofHorticulturalPlantBiology(HAU)，MinistryofEducation；NationalCenterforVegetableImprovement(CentralChina)； HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan，Hubei430070，China) Abstract：Lateblight，causedbyPhytophthorainfestans，isadevastatingdiseaseofpotato．Itisimportanttodistinguish whatkindofRcontainedinpotatocultivarorpotatobreedingmaterialsforpotatolateblightresistantbreedingandcontrollate blightthroughmanagementofdifferentR genes．Accordingtothe g‘ene—for-gene’hypothesis，theinteractionbetween pathogenavirulencegenes(Avr)andresistantgenes(R)willleadtohypersensitiveresponse(HR)inpotato．So，itispossible todistinguishhostR genebyAvrgeneexpressioninpotatoleaves．Inthisstudy,effortsweremadetodistinguishpotatoR genesbytransientexpressing只infestansAvrgeneinpotatoleavesusingagro-