相思树种组织培养研究进展和存在的主要问题.pdfVIP

相思树种组织培养研究进展及存在的主要问题 施琼1黄烈健1+胡峰2陈祖旭1 (1．中国林业科学研究院热带林业研究所，广东广州510520；2．厦门大学生命科学学院，福建厦门 361005) 摘要：综述相思树种组织培养技术研究进展的基础上，分析存在的主要问题，并结合研究实例提 出了相应的解决方法，可为推动相思树种工厂化组培育苗提供参考。 关键词：相思；组织培养；研究进展；存在问题 开始引入大叶相思、马占相思等，在荒山造林、公路绿化中发挥了巨大的作用B-4]。近年来，相 思树种以其速生高产、改善土壤条件、高效固氮、涵养水源等特点，以及适合于纸浆、药用、板 材、栲胶等用途，而被大力推广种植。相思种子繁殖具有一定的分化性， 树形、生长量、抗性、 纤维含量等性状表现差异较大，对加工利用极为不利。因此，利用种子繁殖对相思的开发利用和 生产会造成很大约束[5】o 成功报道已有10多个树种。作者通过对相思组培技术研究进展和存在的问题进行综述的同时， 结合自己对马大杂种相思组培的研究结果提出了相应的解决方法。 1 相思树种组培技术进展 目前，相思树种中的杂种相思、马占相思、大叶相思、卷荚相思、厚荚相思、黑木相思等组 培快繁技术发展迅速并日趋成熟，以茎段、下胚轴、叶片等作为外植体成功诱导出再生植株的报 道不断出现。 1．1外植体的选择 曹孜仪等[7】认为带腋芽茎段作为组培的外植体比叶片和下胚轴诱导的从生芽遗传变异小，是 较为理想的外植体材料。苏锦强等[8坤旨}H，取枝条·卜卜部木质化程度较高的带腋芽茎段切段的消 毒成功率明显高于项芽。黄烈健等【。】研究表明，4．5年生成年树上采的枝条，内生菌的含量较高， 污染率高。黄骐【m】研究表明，外植体应当选用连续晴天时所采集的枝条，阴雨天采条时的污染 率为96％。作者研究发现：在选择马大杂种相思外植体时，当年生的新枝第3—5个腋芽茎段芽诱 导率最高(图1)；消毒污染率仅次于顶芽为20％(图2)。 80 o60 u40 矗20 O “ “ 型 型 糊 壤 却 菇 图I：不同取材及部位对出芽率的影响 图2：不同取材来源及部位对污染率的影响图 因而，综合前人的研究并结合作者的实验，外植体的选择可归纳如下：在夏秋季节，选择无 虫害的生长健壮的1．2个月伐桩新萌条，选取腋芽饱满的茎段中的第3，5个腋芽，芽诱导率高且 污染率低。 1．2消毒体系的建立 消毒体系的关键在于消毒剂选择和消毒时间的把握。相思树种组培外植体消毒一般选用酒 精、升汞、菌毒清、次氯酸钠为消毒剂，以75％酒精与0．1％的升汞配合使用最为常见，其他效 果较差。马占相思和大叶相思采用6％的次氯酸钠40min消毒，虽污染率降低但存活率也降低至 8％ou；荣世清等f】2】使用单纯的5％菌毒清灭菌，结果全部污染。采用多种消毒剂联合或混合使 用如添加适量吐温，能达到较好的消毒效果，张月娇【13]在厚荚相思的外植体消毒时先用到1g·L一1 的灭菌净浸泡10min，然后用75％酒精和0．1％升汞消毒，效果较好；苏锦强等【8。，]在采条前2周 时使用2gLJ的多菌灵喷洒采条部位，能有效减轻污染。 476 作者在对马大杂种相思外植体进行消毒时结合相关文献设置如下4中消毒方法： 2 方法一：75％酒精30s+6％次氯酸钠1min+清洗4-6遍 方法二：75％酒精30s+0．1％升汞12rain+清洗4-6遍 方法三：1g／L多菌灵泡30min+75％酒精30s+0．1％升汞(加吐温2滴)15min+清洗6-8遍 方