HPLC法测定五味子种子发芽过程木脂素的含量.pdfVIP

中华中医药学会四大怀药与地道药材研究论坛暨中药炮制分会第二届第五次学术会议与第三届会员代表大会论文集 HPLC法测定五味子种子发芽过程木脂素的含量 王金辉’1一，李国玉2，王宏志3，王志成1，曾毅梅1，李辰1，李铣1 (1沈阳药科大学，辽宁沈阳110016；2石河子大学，新疆石河子832002； 3通化师范学院数学系，吉林通化134002) 摘要 目的考察五味子种子中的木脂素类成分在发芽过程中含量的变化。方法采用HPLC 法测定五味子醇甲，五味子醇乙，(．)．gomisinN和(+)-gomisinM2，血味予丙素，在五味子种子 中的含量，用线性回归方法考察其线性关系。色谱柱为VenusilxBP．C18，流动相为甲醇．乙腈． 水(体积比为l：l：1)，检测波长为250nm。结果五味子种子中五种木脂素的在发芽过程中均有 下降。结论为研究五味子中木脂素类成分提供参考。 关键词回归方程：线性关系：五味子；木脂素；HPLC chinensis 五味子SchizalldmBaill．为木兰科植物五味子的成熟干燥果实。五味子主产于辽宁、黑 龙江、吉林、河北、内蒙古等地， 故又称北五味子。五味子作为药用植物，始载于《本经》，以后在 《新修本草》、《名医别录》和《本草纲目》等书中都有较详细的介绍。五味子能降低转氨酶，临床用 于治疗慢性肝炎，包天桐用四氯化碳、硫代乙酰胺和乙炔雌二醇环戊醚引起小鼠肝损伤为模型，发现 五味子醇提物和从五味子中分离出的五味子甲素、乙素、丙素、醇甲、醇乙、酯甲和酯乙均有不同 程度的降低因化学物质引起的血清转氨酶升高作用。木脂素类化合物主要存在于五昧子种子中。为 了解木脂素类成分在五味子种子发芽过程中含量变化，作者对从五昧子乙醇提取物中得到的五味子 M2，五味子丙素的含量进行了测定。该方法准确、 醇甲，五味子醇乙，(一)一gomisillN和(+)一gomisin 可靠、快速，可为进一步合理开发利用五味子药用资源提供参考。 l仪器与材料 动化仪表研究所)，J鹊co高效液相色谱仪：Pv．2080plus型输液泵，CD．2095plus紫外检测器， Lc．NetII／ADC色谱数据处理系统。 甲醇、乙腈(色谱纯，天津康科德科技有限公司)，水(纯净水，杭州娃哈哈)，五味子种子 (采自吉林，经沈阳药科大学孙启时教授鉴定)。 2方法与结果 2．1五味子种子的发芽培养 取16份五味子种子，每份209，洗净，下层放置一层滤纸保湿，上层放置纱布，置于种子幼苗 培养箱中培养(16h光周期，20．25℃)。每天取其中一份冷冻保存。 2．2色谱条件 色谱柱为Venusil 速1．Oml·min一，检测波长250nm，柱温300C，进样量20uI。 2．3对照品溶液制备 精密称取五味子醇甲29．2mg，置10mI量瓶中，甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀，O．45pm微孔滤 膜滤过，即得五味子醇甲的对照品溶液A。精密称取五味予醇乙对照品8．0mg，置lOml量瓶中，甲 醇溶解，稀释至刻度，摇匀，0．45岬微孔滤膜滤过，即得五味子醇乙的对照品溶液B。精密称取 -253- 质量与化学 O．45肛m微孔滤膜滤过，即得(-)-gomisinN和(+)．gomisinM2的对照品溶液C。精密称取五味子丙素对 照品3．4mg，置10ml量瓶中，甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀，0．45¨m微孔滤膜滤过，即得五昧子丙 素的对照品溶液D。 参!势妒!》_》～ 五味子醇甲 五味子醇乙 N M2 五味子丙素 (．)唱omisin (+)·gomisin 2．4供试品溶液制备 精密称取不同发芽阶段的五昧子种子O．59(已粉碎)，置50mI圆底烧瓶中，加25ml甲醇回流提 取，滤过，置25mI量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，O．45岬微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。 2．5用线性回归考察其线性关系 按比例(各对照品溶液吸取量见表1)分别精密吸取对照品溶液A，B，C，D，置2ml量瓶中，甲醇 定容，摇匀，O．45“m