用INT2表征厌氧颗粒污泥ETS活性的方法及应用研究.pdfVIP

用INT2表征厌氧颗粒污泥ETS活性的方法及应用研究 陈 皓1 陈 玲黄爱群 (同济大学污染控制与资源化研究国家重点实验室。上海200092) 摘要 介绍了污泥电子传递体系(ETS)的概念，建立了用氧化还原染料INT检测厌氧污泥ETS活 性的方法，并用该方法检测了2一氯酚厌氧降解过程种污泥ETS活性的变化及金属Cd2+对厌氧颗 粒污泥ETS活性的影响。研究结果表明该方法操作方便，结果可靠，灵敏度高．适于推广应用． 关键词 电子传递体系 INT厌氧污泥 l理论基础 1．1 ETS概念介绍 污泥中微生物的一切活动都需要生物氧化作用产生的能量[I】。微生物的生物氧化作用其实质就是微生 物细胞呼吸作用中的一系列氧化还原作用。生物氧化作用．也就是完整的呼吸过程，即呼吸链必须在酶的催 化作用下才能完成。参加生物氧化的重要酶类为氧化酶和脱氢酶．其中脱氢酶尤为重要。脱氢酶又分为需氧 脱氢酶和不需要脱氢酶。兼性微生物和厌氧微生物在无氧或缺氧环境下进行的代谢氧化就需要在不需氧脱 氢酶的催化作用下完成。完整的呼吸链，其传递过程除了酶的作用以外还需要多种传递体(电子递体或递氢 体)的依次传递。无论是酶还是传递体受到了影响都会对微生物的呼吸活性产生影响。 污泥的电子传递体系(ElectronTransportSystem，以下简称ETS)活性是应用较多的污泥生物活性评价方法 之一，其方法实质是利用氧化还原染料测定污泥的呼吸活性来间接指示活性污泥的生物活性t2·“。氧化还原染 料的作用是作为人工受体在微生物电子传递体系的作用下会接受电子而还原，并发生明显的颜色变化。 1．2 ETS活性在表征污泥活性中的作用 Chloride(简 Tetrazolium 称TTC2)和2-(p-iodopheyi)一3一(p-nitrophenyl)一5一phenyl 受电子还原后的产物都是三苯基甲脂(Formazan)。三苯基甲脂为紫红色，其生成速率及颜色深浅可以反应出 污泥ETS活性的大小。污泥活性任何异常变化都会使污泥的ETS活性改变从而降低三苯基甲脂的生成速 率。但废水中出现重金属或其它毒性污染物时，污泥的MI，ss、MI．VSS、污泥中微生物的种群等性质可能尚 未发生改变，但污泥的ETS活性却能表现出较大的变化，从而较早地预告污泥活性的改变，甚至能够反应出 毒性物质影响污泥活性的等级¨J。由于两种染料在呼吸链上接受电子的位置之前的微生物的各种酶(包括脱 氢酶)及电子递体的活性或功能发生的变化都会在三苯基甲脂的生成速度和颜色深浅上反映出来．因此用 TTC和INT两种氧化还原染料测得的应是污泥的ETS活性．而不仅是许多文献上所说的脱氢酶的括性。 1．3 TTC2和INT2的检测特性比较 TTC2和INT2是两种具有不同官能团的四唑盐，由于官能团的差异决定了这两种物质在检测污泥ETS 活性时具有不同的特性Is3。文献记录两种四唑盐中TTC2表征污泥ETS活性变化的灵敏度较高【6_“，这从 TTC2和INT2从微生物呼吸量上接受电子部位的差异也可以得出类似的结论。从图l[5·们中可以看出。 TTC2是从微生物氧化呼吸链的末端接受电子的，电子在呼吸链上经历了一个完整的传递过程，其中任何一 个环节在传递过程中受到影响都会影响最重的TTC电子传递活性。而INT2从呼吸量上接受电子的位置较 早。如果电子传递过程在细胞色素b后受到抑制或者被阻断，就不会影响到INT2的ETS活性。因此TTC2 电子传递活性比INT2的电子传递活性更容易受到抑制。因此也更灵敏。但TTC2的氧化还原电位较高 ·-—— 230．．—— (+490my)．对电子的亲和力小．与氧竞争电子的能力弱。应避免氧气对实验结果的干扰，并且不适合检测厌 的能力强，实验可在有氧的条件下进行，可用于检测好氧、厌氧及脱氮污泥的ETS活性限3’91． 待 INT 11℃ FeSI 氧 FeS2 _ S C C Cu