芦丁的提取.pptVIP

实验 红枣中黄酮类化合物（芦丁、槲皮素）的提取、精制与鉴定 概 述 黄酮类化合物广泛存在于自然界，是一类重要的天然有机化合物。其不同的颜色为天然色素家族添加了更多色彩。这类含有氧杂环的化合物多存在于高等植物及羊齿类植物中。 分布：黄酮类化合物在花、叶、果等组织中多以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在。(苷，即糖苷的简称） 性质：黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便易行，芦丁、橙皮苷、黄芩（qin)苷提取都应用此法。 一 实验目的和要求 实验目的： 以槐米中提取黄酮类化合物--芦丁，掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作 通过芦丁结构的检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法 掌握黄酮类化合物的化学定性鉴定，熔点和薄层分析等方法，了解UV及NMR在苷类结构鉴定中的应用 实验要求 获得三个化合物：芦丁、槲皮素、芦丁的全乙酰物 能根据化学实验及UV、NMR数据初步推断出芦丁的结构。并对黄酮类化合物的结构测定有一般性的了解 实验原理 提取原理---芦丁分子中有酚羟基，呈弱酸性。在碱水中成盐而增大其溶解度。然后，在酸中不溶而沉淀析出，从而进行提取。 精制原理---利用芦丁易溶于热水或热甲醇，而较难溶于冷水或冷甲醇，由此进行重结晶而精制。 芦丁— 槲皮素— 实验流程 苷水解反应 芦丁中糖的鉴定 1、取一对直径大小相同的培养皿，内置一小层析槽，装上展开剂，密闭。 2、取一圆形滤纸，以圆心为中心，用铅笔将其分为六等份，分别标注。将标准品和样品用毛细管在距圆心1cm处分别以弧形点样[1]，挥干溶剂。 3、另取一小长条滤纸卷成纸卷，从圆滤纸的圆心处穿进去，插入层析槽的展开剂中上下培养皿密闭。由于毛细作用，展开剂在滤纸上不断水平扩散，当展开至距原点5-6cm处时取出，红外灯下烘干，喷显色剂，再烘至显出斑点为止。观察结果并记录Rf值。 注：[1]为确定点样量，应先做纸斑反应。方法为：取一长条滤纸，用毛细管分别点不同量的样品溶液，红外灯下烘干，喷显色剂，再烘至显出斑点为止。确定最佳点样量。 芦丁粉碎不可过细，以免过滤时速度过慢 加入石灰乳即可达到碱溶解提取芦丁的目的，还可以除去槐花米中含有的大量多糖类粘液质，但pH值不能过高，否则钙能与芦丁形成螯合物而沉淀析出 pH值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解，降低收率（最佳pH值为5） * * 惠岑怿 生命与化学科学学院 化学实验中心 芦丁的提取与定性反应 芦丁的提取与定性反应 槲皮素 芦丁 芦丁十乙酰化物 芦丁的提取与定性反应 搅拌下加入石灰乳（4gCaO加40ml) 加1g硼砂和250ml水 槐花米（25g） 调节PH8-9 直火加热 保持微沸30min 趁热过滤 滤液 残渣 在60-70℃下，用浓盐酸调PH3-4 静置 提取 芦丁的提取与定性反应 黄酮苷的水解 滤液 沉淀（粗品芦丁，60℃烘干） 均分2份 重结晶 苷水解 抽滤 按1：60量加入蒸馏水，沉淀悬浮于蒸馏水中，加热煮沸15分钟后，趁热抽滤 残渣 滤液 冷却 抽滤 精制芦丁（ 60℃烘干，备用） 按1：70量加入2%硫酸，加热40min，放冷静置，抽滤 沉淀 滤液（苷） 干燥 槲皮素（备用） 糖鉴定 芦丁的提取与定性反应 +鼠李糖+葡萄糖 糖的鉴定 水解所得滤液5ml 用Ba(OH)2乳调PH值至中性，折叠扇形滤纸过滤白色沉淀 1.5g Ba(OH)2加10ml水 残渣 滤液 蒸干，放冷 加1ml95%乙醇溶解得样品溶液 纸色谱 芦丁的提取与定性反应 糖的纸色谱鉴定 标准品：葡萄糖乙醇液、鼠李糖乙醇液 展开剂：正丁醇：醋酸：水（4：1：5，上层） 显色剂：喷邻苯二甲酸苯胺显示剂，105℃烘箱加热10min,显棕色斑点 点样 层析 芦丁的提取与定性反应 定性反应 盐酸-镁粉反应 将样品溶于1ml乙醇，加入少许镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，1-2min内，观察颜色变化。 Molish反应 将样品溶于1ml乙醇，加入等体积10%α-萘酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸，注意观察两界面产生的变化。 黄酮母核 苷类 芦丁的提取与定性反应 芦丁的全乙酰化 芦丁 0.1g 加入2ml无水吡啶 加入8ml醋酐 反应液 直火，水浴上回流30min，放冷，搅拌下将反应液倒入70ml水中，一直搅拌到油滴消失，白色沉淀析出为止 反应液 抽滤，干燥 反应物 防 水 芦丁的提取与定性反应 聚酰胺薄层色谱 样品：分别取少量芦丁、槲皮素、芦丁的十乙酰 化物用1ml95%乙醇溶解 展开剂：75%乙醇 10ml 显色剂：氨水，2%AlCl3 /EtOH 芦丁酰化物 槲皮素 芦丁 样品 槲皮素 芦丁