陆地棉原生质体培养与植株再生技术研究.pdfVIP

棉 花 学 报 CottonScience 2008，20(6)：403～407 陆地棉原生质体培养与植株再生技术研究 汪静儿 ，孙玉强。燕树锋 ，道 德 ，沈晓佳 ，祝水金 (浙江大学农业与生物技术学院，浙江杭州 310029) 摘要 ：分离培养 陆地棉 品种ZDM一3(Gossypiumhirsutum LcvZDM一3)胚性细胞悬浮系的原生 质体 ，通过体细胞胚胎发生成功获得再生植株。试验结果表明，植物生长调节剂组合和碳源对 原生质体培养具有重要的影响，添加 2，4一D+ KT+ 1．5 (w ／V)葡萄糖+ 1．5 (w ／V)麦 芽糖 的KM8P培养基对于陆地棉原生质体培养 的效果较好。激素组合 0．46~／mol·L KT + 0．45umol·L 2，4D诱 导的愈伤组织较松软，分化潜力高；胚性愈伤组织 的增殖使用 0．93umol·I。KT+ 2．46￡上mol·I。IBA 的激素组合；1．2~／mol·L-IBA + 1．39,／mol· L。KT有利于体细胞胚胎发生，而 MSB4-0．67x／mol·L-KT-42．69／,mol·L。NAA 的培 养基适合体细胞胚胎萌发和植株再生。此外，愈伤组织诱导宜用葡萄糖作为碳源，而胚性愈伤 组织增殖 、保存和胚状体 的萌发过程宜使用麦芽糖作碳源。 关键词：陆地棉；原生质体培养；体细胞胚胎 ；植株再生 中图分类号 ：$562．035．3 文献标识码 ：A 文章编号 ：1002—7807(2008)06—0403—05 StudyonthePlantRegenerationfrom ProtoplastsofUplandCotton (Gossypi— um hirsutum L．)ViaSomaticEmbryogenesis WANG Jing-er，SUNYuqiang，YANShu-feng，DAUDMuhammad-khan，SHENXiao-jia，ZHU Shui-jin (CollegeofAgricultureandBiotechnology，ZhejiangUniversity，Hangzhou310029，Zhejiang，China) Abstract：Efficientplantregenerationfrom protoplastisolatedfrom suspensionculturecellsviasomatic embryogenesiswasdevelopedinuplandcotton (Gossypium hirsutum L．)cultivarZDM一3．Microcalli wereformedafterbeingculturedinKM8Pmedium with0．45gmol·L 2，4一D，0．93~,mol·L KT， 1．5 (W ／V)glucose，1．5％ (W ／V)maltoseand9．0 (W ／V)mannitolforabouttwomonths．Cal— liwith 2mm indiameterweretransferredtosolidproliferatedmedium．A greatdea1ofsomaticembry— osandregeneratedplantswereoccurredinthemedium ofMSB5-42．46 ~／mol·L IBA-40．93mol· L。KT-43 (w ／v)glucose-4 0．25 (w ／v)phytage1．Theregeneratedplantsweregraftedtotrans— plant，survivalpercentagewasabove95 ．TheresultsshowedthatA cottonprotoplastculturesys～ tern forZDM 3washighlyimprovedbythethreekeystepsnamely，highproto—callusformingefficien— cy，high conversionrateofsomaticembryotoplantletsandhighsurvivalprobabilityoftransplanting． Theresultsshowedfurtherthatthereweregreateff