土壤中分解尿素的细菌的分离.pptVIP

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土壤中分解尿素的细菌的分离.ppt

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 重点:从土壤中分离分级纤维素的微生物 * * 二:研究思路: (一)、筛选菌株  1、Taq细菌能忍受93OC左右的高温,是美国微生物学家托马斯.布鲁克于 1966年在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的,这说明寻找目的菌株时,要根据他虽生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。 2、实验室中微生物筛选的原理:人为提供目的菌株的生长的条件(包括营养、温度、PH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。 选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类微生物生长,同时抑制其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基 作用:主要应用于菌种分离 [分析本课题使用的培养基]: KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4.7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 碳源:葡萄糖 ; 氮源:尿素; 无机盐:KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4.7H2O 凝固剂:琼脂 该培养基的选择作用主要是通过尿素来实现的。 原因:在这个培养基中,尿素是唯一的氮源,只有能够利用尿素的细菌才能在这种培养基上正常生活。 (二)、统计菌落数目: 常用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。 原理:当样品的稀释度足够时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。 注: (1)为保证结果准确,一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。 (2)为增强实验准确性,一定要涂布至少3个平板,作为重复组。 (4)显微镜直接计数法(镜检计数)也是测定微生物数量的常用方法,另外也可采用滤膜法 (三)设置对照 1、目的:排除试验组中非测试因素对实验的结果的影响,提高实验结果的可信度。 注:对照实验的分类; 空白对照:不给对照组任何处理因素 条件对照:给对照组部分对照因素,但不是所要研究的处理因素。 自身对照:对照和实验都在同一研究对象上进行。 相互对照:不单设对照组,而是几个试验组相互对照。 分析:P23 A同学出现不同试验结果的原因:①土样不同;②培养基被污染或操作有误 对照组设置: 方案一:其他同学取与A同学相同的图样进行培养,若结果与A相同,则说明A无误;反之,则有误。 方案二:将A同学配置的培养基在不加土样情况下进行培养,作为空白对照,以证明A的培养基是否受到污染. *

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