柴油分解菌与营养盐对柴油分解关系之研究.pdfVIP

柴油分解菌與營養鹽對柴油分解關係之研究 方俊傑、簡錦樹 國立成功大學地球科學研究所 摘 要 本研究以中油廢水處理廠一級污水，分離出柴油分解菌株，於石英砂中分解 4 3 4 2 4 柴油污染物，在各種不同的營養鹽 NH )NO 及(NH )H PO 生長 天的環境下試驗 ( 90 其分解效率與細菌生長量。以分解效率而言，油分解菌若無營養鹽時分解率最低 為12.5%，僅有氮營養鹽時油分解率達到26.0%，若同時以N:P=10:1為營養鹽其分 解率可達到 另外 以 培養基當營養鹽分解率最高可達 33.4%, , Bushnell-Haas 37.8 % 。因此，當有氮營養鹽時柴油分解效率可提高一倍以上。若再加入磷之營養鹽 時，油分解效率約為無營養鹽分解之三倍。油分解菌若無營養鹽時，第 天油分 90 解菌生長量僅為6×106 7 CFU/g，以氮營養鹽時油分解菌生長量為5.9×10 CFU/g。以 8 N:P=10:1為營養鹽時分解菌生長量為2.2×10 CFU/g。以Bushnell-Haas培養基當營 8 養鹽油分解生長量最高可達3.5×10 CFU/g。因此，氮與磷之營養鹽對柴油菌分解 柴油關係影響非常重大。 將柴油分解菌株與以分離及純化，經 16S rDNA基因序列分析比對為 PseudomonasAcephalitica 。 前 言 石油及其相關產品的使用已成為民生必需品的地步，交通工具使用的汽油、 柴油等及石油提煉出來的化學原料如人造纖維、塑膠與民生使用的天然氣、瓦斯 等，石化產品之使用儼然一切工業的基礎。但隨之而來石油系列物質污染亦日益 嚴重，其主要來源來自地表或地表下的儲槽或管線因腐蝕產生洩漏事件，當這些 污染物進入生物體後，經過代謝過程可能危害人體健康。 利用微生物降解法來進行土壤或地下水的石油污染整治工作在近年來獲得 極大的重視，因為此種方法操作簡單、且能有效處理大量污染場址的污染物。但 是微生物降解碳氫化合物的過程非常複雜，所以如果能瞭解的微生物在土壤中降 解碳氫化合物的行為、影響因素等，將對環境污染之整治如土壤復育或地下水整 治等工作有極大的助益。 試驗方法 本研究以中油廢水處理廠一級污水，分離出柴油分解菌株，於石英砂中分解 柴油污染物，在各種不同的營養鹽(NH4)NO3 及(NH4)H2PO4 生長 90 天的環境下試 驗其分解效率與細菌生長量。 菌種培養、柴油分解試驗： 以Bushnell-Haas培養基加入柴油，並加入少量中油廢水處理廠一級污水菌 液，於30℃耗氧環境下進行柴油分解菌種培養。在準備多隻玻璃管分別置入8g 小於2mm之石英砂並分別加入1(NH4)NO32(NH4)NO3 及(NH4)H2PO4 3(NH4)2SO4 及(NH4)H2PO4 4Bushnell-Haas培養基及80mg之柴油於30℃耗氧環境下進行柴 油分解試驗。每隔15天取樣分析，以塗抹髮測量細菌生長量與以G.C分析土壤 中柴油濃度計算分解效率(分析方法為NIEA S286) 。本實驗共進行90 天，於第 60 天時再加一次相同量之營養鹽於石英砂玻璃管。 菌種分離及鑑定： 菌種之DNA萃取及PCR(聚合酶連鎖反應)之16SrDNA基因放大： 將純化之單一菌種以液態培養