氮素相关测定方法.docVIP

二.亚硝态氮、硝态氮、铵态氮、尿素测定 1.硝态氮测定（紫外分光光度校正因数法） 1.约测：吸取水样（土壤浸提液）注入1cm光径石英比色杯中，以浸提剂为参比，在210nm波长处约测吸收值。根据约测结果，测定浸出液应予稀释的倍数，使吸收溶液吸收值在0.1~0.8之间。 2.测定：水样（浸出液）稀释一定倍数后，吸取25ml放入50ml三角瓶中，加入1.00ml 1：9硫酸溶液，摇匀。装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275，以同样稀释酸化后的饱和硫酸钙溶液为参比溶液，调节仪器的零点。 3.工作曲线绘制：吸取10mg/LNO3—N标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00ml于50ml容量瓶中，（加一定体积浸提剂）定容。即得0.00、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60mg/LNO3—N标准溶液。各取25.00mL于50ml三角瓶中，加1.00ml1：9硫酸溶液，摇匀。装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275。 4.结果计算： ΔA= A210-A275f 其中f为校正因数，在土壤有机质含量小于50g/kg时，f可取2.2，若大于土壤有机质含量大于50g/kg，需重新测定。 硝态氮含量（mg/kg）=c*V*D/m 其中c为溶液中硝态氮浓度（mg/L），V为浸提液体积（mL），m为烘干土样质量（g），D为浸出液稀释倍数，不稀释时为1。 2.亚硝酸根的测定（重氮化耦合分光光度法） 吸取50mL水样于100mL容量瓶中，加4mL对氨基苯磺酸显色剂及4mLa-萘胺显色剂，加蒸馏水至刻度摇匀。放置20min后在分光光度计上用530nm波长进行比色，读取透光度。 绘制标准曲线：吸取亚硝酸盐标准溶液0、0.5、1、3、5mL，分别放入100mL容量瓶中，此标准系列含亚硝酸根分别为0、0.05、0.1、0.3、0.5mg/L，与待测水样同样条件进行比色，绘制标准曲线。 结果计算：c(NO2-)=C1*V1/V2 其中C1为曲线上差得的亚硝酸根浓度，mg/L。V1为显色剂体积，mL。V2为吸取水样体积，mL。 3.铵态氮的测定（靛酚蓝比色法） 吸取水样（土壤浸提液）2~10mL放入50mL容量瓶中，用氯化钾补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸钠碱性溶液5mL，摇匀。在20℃左右室温放置1h，加掩蔽剂1mL以降解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。在分光光度计625nm波长处比色。 工作曲线绘制：分别取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mLNH4+—N标准溶液于50mL容量瓶中（各加10mL氯化钾溶液），后同上。 结果计算：铵态氮含量（mg/kg）=c*V*D/m 其中c为查得质量浓度（g/L），V为显色液的体积（mL），D为分取倍数，m为烘干土样质量。 尿素量测定（8.8—107mg/L） 标准尿素储备液(1000 mg／L)：准确称量1．0000 g分析纯尿素溶于水并于1000 mL容量瓶中定容，4℃条件下存放。 对二甲氨基苯甲醛显色剂溶液：称取4.0000 g对二甲氨基苯甲醛，加入96mL无水乙醇和4mL浓硫酸混合液混匀，储于棕色瓶中，避光保存。常温可保存一个月。 标准曲线的制作与样品的测定： 准确吸取尿素标准溶液[P(N)=0．5 mg／mL]0、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0 mL，分别置于25mL容量瓶中，加水至大约10mL，各瓶中分别加入5．0 mL对二甲氨基苯甲醛溶液，充分摇匀并定容，显色10 min。使用722型分光光度计，在波长430 nm处，用1 cm比色杯，以未加尿素标准溶液的试液为空白，测定各溶液吸光度，制作标准曲线。样品测定时，用含一定量尿素的样品溶液(提取液)代替标准溶液，其它步骤相同。 标准尿素储备液(1000 mg／L)：准确称量1．0000 g分析纯尿素溶于水并于1000 mL容量瓶中定容，4℃条件下存放． 对二甲氨基苯甲醛显色剂溶液：称取4.0000 g对二甲氨基苯甲醛，加入96mL无水乙醇和4mL浓硫酸混合液混匀，储于棕色瓶中，避光保存。常温可保存一个月。于25 mL具容量瓶中中分别加入0、0.5、1、1.5、2、2.5、3 mL标准尿素储备液配制而成的浓度为0、20、40、60、80、100、120mg／L的尿素溶液，然后加人5.0 mL显色剂，摇匀，显色10 min，于422 nm处，以空白调零测定其吸光度A，并绘制尿素测定标准曲线．样品测定时，用含一定量尿素的样品溶液(提取液)代替标准溶液，其它步骤相同。