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甘肃省红古区草莓根际寄生线虫的分离与鉴定.pdf
甘肃省红古区草莓根际寄生线虫的分离与鉴定
雷宏斌 李雪红
甘肃农业大学草业学院,甘肃兰州(730070 )
E-mail :Leihb83@163.com
摘 要:2005 年7 月份,对甘肃省红古区张家寺草莓根际的植物寄生线虫进行了广泛调查,
共采集到25 份土壤样品,采用浅盘法共分离出了植物寄生线虫 8 个属,6 个种和一些待定
种。其中,包括短体线虫属(Pratyle nchus) 、螺旋线虫属(Helicotyle nchus) 、滑刃线虫属
(Aphelenchoides )、剑线虫属(X iphi nema )、长针线虫属 (Longidorus )、茎线虫属
(Diytlenchus )、根结线虫属(Meloidogyne )、大节片线虫属(Macroposthonia )。
关键词:草莓 根际寄生线虫 分离 种类鉴定
植物寄生线虫是世界农作物,果树,林木,花卉及药材上重要的病原生物之一 ,其
危害超过细菌和病毒,仅次于真菌病害(韩生成,刘清利等 1999),它对全世界农业产生有
很大影响.据不完全统计,全世界每年因线虫危害所造成农作物经济损失约在 1000 亿美元以
上(Sasser.J.N.1989)[1] 。近年来,随着我国集约化高效农业的发展,各种经济作物发展迅速,
草莓以其生长周期短、管理方便、果实营养丰富、柔软多汁而著称,尤其含有大量的维生素
C,素有“水果皇后”的美称[2] 。一般栽植数月后就有产量,早春草莓可弥补水果的淡季市
场,并可借助不同地理位置、气候条件及设施,在一年内进行多次生产,实现周年供应。80
年代初,随着改革开放和农村经济体制改革的发展,各级政府及科研单位对草莓生产开始重
视,使草莓生产迅速发展。引进并筛选一些优良品种在生产上迅速推广,栽培面积迅速扩大,
栽培方式从原来单一的露地栽培发展为多种形式并存,大大提高了经济效益。草莓以其周期
短、见效快、经济效益高、适于保护地栽培等特殊优势而成为中国果树业中发展最快的一项
新兴产业,有的地区草莓种植业还成为当地农村经济发展的支柱产业。但由于连年种植,复
种指数高,致使线虫病的发生日趋严重,造成草莓的大幅度减产,生产上要求治理的呼声很
高。针对此问题,本实验选择我省兰州市红古区草莓种植区定远镇作为实验的材料采集地,
对该地区的草莓根际寄生性线虫作了初步的调查,对其种类进行分离和鉴定。
1.材料和方法
1.1 草莓根际线虫土壤样品的采集
[3]
在草莓生长季节 7 月份从红古区张家寺,用随机五点取样的方法 分别采集健株,轻病
株,重病株三类草莓的根系及根周围 5~20cm深的耕作层土壤(采集时,取具“结节状”明
显的新病根及根际土壤),每份土样由 5 点取到的根围土组成。写好标签后随即放在聚乙烯
薄膜袋中,带回实验室尽快分离。
1.2 土壤样品的分离
[4]
用浅盘法 分离不同发病程度的土样中的线虫:将 200g土样平放在铺有一层面巾纸的筛
盆中。把筛盆放在装有适量清水的底盘内,静置 24h后移动筛盆,将底盘中的线虫悬浮液通
过 500 目(孔径 26µm) 的筛子收集线虫于小烧杯中。
-1-
1.3 线虫的杀死和固定
[4]
用热杀死法 杀死收集的线虫后,用 4% 的福尔马林液固定,保存。
1.4 线虫数量的统计
对固定保存的线虫进行统计:以每200g 土样中分离出来的线虫为一个样本,将其放在培
养皿中在解剖镜下计数。
1.5 制片[1]
1.5.1 临时玻片 挑取固定后的线虫,放在载玻片的水滴中,用挑针使虫体沉没水底。另取
三根与线虫粗细相近的玻璃片,按三点等距排列在水滴边缘,再用挑针挑取线虫,尽量平行
排列,加盖玻片,用凡士林封盖玻片边缘。
1.5.2 半永久玻片和永久玻片
蠕虫状线虫的整体玻片 制作半永
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